Klíčové enzymy pro produkci dlouhé RNA
mRNA, jako typ dlouhé kódující RNA, fungovala během COVID-19 bezpečně a efektivně u širšího spektra lidí. Jiné dlouho kódující RNA, jako je samoamplifikující RNA (saRNA) a kruhová mRNA (circRNA), také prokázaly účinnost v preklinických a klinických studiích.
Produkce dlouho kódující RNA ve velkém měřítku závisí na in vitro transkripci (IVT) prostřednictvím několika enzymatických reakcí. Kroky produkce RNA zahrnují přípravu templátové DNA, IVT syntézu RNA, cirkulaci, odstranění DNA, modifikaci RNA (capping a tailing) a purifikaci RNA.
Existuje několik klíčových enzymů používaných při produkci RNA s dlouhým kódem (např. mRNA, saRNA a circRNA), včetně restrikčních endonukleáz, T7 RNA polymerázy (T7 RNAP), inhibitoru RNázy, anorganické pyrofosfatázy, DNázy I, enzymu pro čepování vakcínie a RNázy R.
|
Proces
|
Enzym
|
funkce
|
|
Příprava šablony DNA
|
Restrikční endonukleázy
|
Linearizace plazmidové DNA (pDNA), aby se zabránilo generování delšího transkriptu.
|
|
Syntéza IVT RNA
|
T7 RNA polymeráza (T7 RNAP)
|
Navázat se na promotor T7 a vytvořit specifický RNA transkript; Hrajte klíčovou roli během IVT reakce.
|
|
Inhibitor RNázy, rekombinantní
|
Inhibujte aktivitu RNázy během IVT reakce.
|
|
Pyrofosfatáza, Anorganická (iPPáza)
|
Zabraňte pyrofosfátům během IVT reakce.
|
|
odstranění DNA
|
DNáza I
|
Odstraňte šablonu DNA.
|
|
RNA modifikace
|
Krycí enzym vakcínie
|
Přidejte struktury Cap1 na 5' konce IVT mRNA.
|
|
2'-O-methyltransferas
|
| obohacení circRNA |
RNáza R |
Digesce lineární RNA a obohacení kruhové RNA. |
Yaohai Bio-Pharma nabízí jednorázové CDMO řešení pro enzymy
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
