Biologické látky jsou složité velké molekuly, které jsou zvláště citlivé na environmentální faktory: teplotu, oxidaci, světlo, iontový obsah a střih. Je kritické provádět studie stability na látkách a léčivách za plánovaných podmínek úložiště, urychlených podmínkách a při vynuceném rozkladu. Data o stability se obvykle používají k podpoře délky užití, data expirace a podmínek úložiště.
V souladu s pokyny ICH Q5C nabízí Yaohai Bio-Pharma služby stability studií pro proteiny, peptidy, plazmidy a mRNA, včetně dlouhodobých studií stability, urychlených studií stability a studií vynuceného rozkladu. Navíc máme všechny nezbytné schopnosti pro úložiště vzorků a analýzu Kritických Kvalitních Atributů (CQA) pro sběr dat o stability.
Regulační požadavky pro studie stability
Podle směrnice ICH Q5C „By měly být vyvinuty přiměřené podpůrné stabilitní údaje pro biotechnologický/biologický produkt, protože mnoho vnějších podmínek může ovlivnit sílu, čistotu a kvalitu produktu. Je také silně doporučeno provádět studie na látkách a produktech za urychlených a stresových podmínek.
Studie reálného času (dlouhodobé) stability
V testování stability v reálném čase (dlouhodobě) je látková forma nebo léčivo ukládáno ve stanovených podmínkách skladování a sledováno, dokud se biologické charakteristiky nezmění mimo přijatelné limity. V důsledku dlouhodobých studií stability lze stanovit držitelnost, datum expirace, podmínky skladování a intervaly vzorkování/testování.
Tabulka 1. Frekvence testování v dlouhodobých studiích stability pre-aprovačních biologických látek
| DELOHNOVÝ ŽIVOT |
Intervaly testování |
Časové body |
| 1 rok nebo méně |
Měsíčně po prvních 3 měsících;
Každé 3 měsíce poté
|
V 0, 1, 2, 3, 6, 9 a 12 měsících |
| Více než 1 rok |
Každé 3 měsíce v prvním roce;
Každé 6 měsíců ve druhém roce;
Ročně následně
|
V 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 měsících a ročně následně |
Zrychlené stability studie
Doporučená teplota úložiště pro infuzní biopharmaceutika je obvykle mezi 2 a 8℃. Zrychlené stability studie jsou prováděny za kratší dobu za zrychlených podmínek, jako je vysoká teplota. Data o stability jsou považována za podpůrné informace pro stabilitu produktu a široce se používají při určování trvání užitnosti a data expirace, stejně jako při vývoji formulace.
Tabulka 2. Příklady zrychlených stability studií
| Studie stability |
Zrychlené podmínky |
Bodů pro vzorkování |
| Zrychlené stability studie |
zvýšená teplota
relativní vlhkost
|
V 0, 1, 2, 3, 6 měsících |
Studie vynuceného rozkladu
Cílem studií vynuceného rozkladu je shromažďovat informace o stabilitě za stresových podmínek, jako jsou vysoké teploty, vlhkost, světlo, oxidace, zmrazení-roztavení nebo mechanický stres (tření, střih). Studie vynuceného rozkladu látky či léčivého přípravku za extrémních podmínek mohou pomoci identifikovat klíčové faktory/parametry vedoucí ke degradaci biologických látek. Tyto údaje jsou užitečné pro posouzení odolnosti formulace a výrobního procesu.
Tabulka 3. Příklady studií vynuceného rozkladu
| Napětí |
Stresové podmínky |
Doba trvání |
| Teplota |
Vysoká teplota (např., 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Dny-měsíce |
| Vlhkost |
Relativní vlhkost (0~100%) |
Dny-měsíce |
| Světlo |
Minimálně 1,2 milionu lx h a 200 W h/m2 |
Několik dní |
| Mrazivá-odmrzávací cyklus |
mrazivá–odmrzávací (z -20℃, -80℃ na 15℃) |
1~5 cykly |
| Tření, míchání |
50~500 ot/min |
Hodiny-dny |
Analytické metody podporující studie stability
| Kritické kvalitní atributy (CQAs) |
Analytické metody |
| Celkový obsah bílkovin |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Viditelné částice |
Vizuální kontrola |
| Agregace, fragmenty |
Dynamické rozptylování světla Vysokoefektivní chromatografie na základě velikosti (SEC) HPLC/UPLC, Kapilární elektroforeze CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), Elektroforeze v SDS-PAGE v neštěpném prostředí |
| Mapování a sekvenování peptidů |
LC-MS/MS |
| Dusíkaté mosty |
LC-MS/MS |
| PTM (oxidace, izomerizace, deamidace, glykosylace) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
