Analýza místa N-glykosylace je klíčová pro porozumění funkcím glykanů. Yaohai Bio-Pharma používá kapalnou chromatografii-masovou spektrometrii (LC-MS) po enzymatickém odstřihnutí pro analýzu místa N-glykosylace.
Angažujeme se v charakterizaci struktury bílkovin různých velkých molekul, včetně rekombinantních podjednotkových vakcín, nanotěles/VHHs/jednodoménových antitěl (sdAbs), fragmentů antitěl, hormonů/peptidů, cytokinů, růstových faktorů (GF), enzymů, kolagenů atd.
Regulační požadavky na místo N-glykosylace
Podle směrnice ICH Q6B: „Pro glykoproteiny se určuje obsah sacharidů (neutrálních cukrů, aminokukrů a sialových kyselin). Navíc jsou analyzovány struktury sacharidových řetězců, vzor oligosacharidů (antenná profil) a místa glykosylace polypeptidového řetězce ve všech možných rozsahů.“
Analytická metoda
Analýza |
Metody |
Místo N-glykosylace |
Jídlová chromatografie - hmotnostní spektrometrie (LC-MS) po enzymatickém štěpení |
Procedury
1. Enzymatické štěpení bílkoviny pomocí trypsínu nebo jiné proteázy
2. Oddělení glykopetidových fragmentů
3. Potvrzení N-glykosylačního místa pomocí LC-MS
4. Analyzujte data