Yaohai Bio-Pharma nabízí služby testování N-terminální sekvence a analýzy dat na základě kapalné chromatografie - hmotnostní spektrometrie (LC-MS) nebo metody Edmanovy degradace, které vám umožňují určit aminokyseliny na příslušných terminách proteiny vašeho zájmu. N-terminální modifikace lze také analyzovat pomocí LC-MS.
Angažujeme se v charakterizaci struktury bílkovin různých velkých molekul, včetně rekombinantních podjednotkových vakcín, nanotěles/VHHs/jednodoménových antitěl (sdAbs), fragmentů antitěl, hormonů/peptidů, cytokinů, růstových faktorů (GF), enzymů, kolagenů atd.
Regulační požadavky pro sekvenaci N-terminálu
Podle směrnic ICH Q6B je nutné potvrdit sekvenci vaší proteiny a zkoumat terminy kvůli jakémukoli možnému rozdílu, který může existovat.
Metody sekvenace N-terminálu
Analýza |
Metoda |
N-termínová sekvenace |
Edmanova degradace, kapalná chromatografie - hmotnostní spektrometrie (LC-MS) |
Procedury
LC-MS
1. Fluorescentní označování N-terminálu bílkoviny
2. Vícekrát probíhající trávení
3. Analýza LC-MS / hmotnostní spektrometrie (MS)
Edmanův rozklad
1. Elektroforetické oddělování vápenku draselného dodecylsulfátu (SDS) vašeho cílového bílkoviny
2. Přenos gelu na membrány z polyvinylidenu fluoridu (PVDF) a barvení
3. Identifikace a vyjmutí cílového pásmu bílkoviny
4. Edmanovo sekvenování N-terminálu
5. Analýza dat