Disulfidové mosty jsou někdy nazývány S-S vazbami nebo disulfidovými mostky. Disulfidové mosty ovlivňují bioaktivitu biologických látek, jako jsou peptidy, proteiny a antitela.
Yaohai Bio-Pharma nabízí služby analýzy disulfidových vazeb především na základě kapalné chromatografie - hmotnostní spektrometrie (LC-MS).
Angažujeme se v charakterizaci struktury bílkovin různých velkých molekul, včetně rekombinantních podjednotkových vakcín, nanotěles/VHHs/jednodoménových antitěl (sdAbs), fragmentů antitěl, hormonů/peptidů, cytokinů, růstových faktorů (GF), enzymů, kolagenů atd.
Regulační požadavky pro disulfidové vazby
V různých biologických látkách existují různé počty a formace disulfidových mostků, které by měly být důkladně zhodnoceny během studií charakterizace proteinu, pokud očekávaná primární amino kyselinná sekvence produktu obsahuje amino kyselinu cystein. Toto je také vyžadováno regulačním dokumentem ICH Topic Q6B.
Analytické metody
| Analýza |
Metody |
| Dusíkaté mosty |
Jeková chromatografie - hmotnostní spektrometrie (LC-MS) po hydrolyze |
Pro nutné údaje pro plnou analýzu disulfidových mostů a volných thiolů provádějí vědci z Yaohai Bio-pharma peptidové mapování po hydrolyzi specifickým proteázem. Následně je analyzováno pomocí on-line LC/Elektrospray Ionizační Hmotnostní Spektrometrie (ES-MS) a/nebo LC/ES-MS/MS před i po redukci.
Yaohai Bio-pharma může také provést Ellmanův test, který je důležitou součástí jakéhokoli kompletního hodnocení produktu obsahujícího cystein. V rámci Ellmanova testu derivujeme sulfhydrilové skupiny pomocí (5,5’-dithio-bis-[2-nitrobenzoic acid]). Pro určení úrovně volných thiolů je následný produkt analyzován pomocí UV spektrofotometrie na vlnové délce 412nm.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
