Enzymatické činidlo

Enzymatické činidlo

Metoda

Proteázy pro odstranění značek

Aby se zlepšila rozpustnost a zjednodušil proces čištění rekombinantních proteinů, výzkumníci obvykle přidávají fúzní značky, z nichž se běžně používají His-tag, maltóza-vázající protein (MBP) a glutathion-S-transferáza (GST).

I když je označen jako další sekvence proteinu, měl by být odstraněn, aby se zachovala biologická aktivita ve farmaceutickém průmyslu. Odstranění fúzních značek vyžaduje místně specifické proteázy, jako je enterokináza (EK), trombin, proteáza viru tabákového leptání (TEVp), proteáza lidského rhinoviru 3C (HRV3C), proteáza malého proteinu modifikujícího ubikvitin (SUMO), virus skvrnitosti tabákových žil ( TVMV) proteáza a karboxypeptidáza A/B (CPA/CPB).

Typ	Enzym	Rozpoznávací web
Endoproteázy pro odstranění značek	Enterokináza (EK), Enteropeptidáza	DDDDK↓
	Trombin	LVPR↓GS
	TEV proteáza	ENLYFQ↓G
	HRV3C proteáza	LEVLFQ↓GP
	SUMO proteáza	SUMO terciární struktura
	TVMV proteáza	ETVRFQG↓S
Odstranění značek exoproteázy	Karboxypeptidáza A (CPA)	C-koncové aminokyseliny, kromě Pro, Lys a Arg
Odstranění značek exoproteázy	Karboxypeptidáza B (CPB)	C-koncový Lys a Arg

Jiné proteázy

editaci videa	Enzym	funkce
Jiné proteázy	Proteáza K	Serinová proteáza, která štěpí proteiny hydrolýzou peptidových vazeb.
	IdeS, IgG proteáza	IgG degradující enzymy (Ides), které štěpí na specifickém místě imunoglobulinu G (IgG), generují Fab a Fc fragmenty
	IgA1 proteáza	Proteolytický enzym, který štěpí specifické místo v sekvenci pantové oblasti lidského imunoglobulinu A1 (IgA1).

Nukleáza

editaci videa	Enzym	funkce
Nukleáza	Nukleáza	Štěpí nukleové kyseliny (DNA nebo RNA) hydrolýzou fosfodiesterových vazeb.
Nukleáza	Omezte enzym	Endonukleáza, která štěpí DNA na konkrétních místech nebo v jejich blízkosti.

Amidase

editaci videa	Enzym	funkce
Amidase	PNGase F	Štěpí mezi nejvnitřnějšími GlcNAc a asparaginovými zbytky vysokomannosových, hybridních a komplexních oligosacharidů.

Všechny kategorie

Enzymatické činidlo

Metoda