Všechny kategorie
Minikruhová DNA

Minikruhová DNA

Hlavní strana >  Modalita  >  Nukleové kyseliny  >  Minikruhová DNA

Modalita

Minikruhová DNA

Minicircle DNA (mcDNA) je menší nevirový DNA vektor odvozený z původní struktury plazmidové DNA. Minicircle DNA se liší od konvenčního plazmidového DNA tím, že obsahuje promotor a geny jistého zájmu (GOI), ale bez počátku replikace (ORI) a selekčního markéru (selMark). Minicircle DNA se produkují v bakteriích prostřednictvím rekombinace in vivo k odstranění přebylých sekvencí (nazývaných mini-plazmida) z plazmidové DNA. Díky své bezpečnosti se minicircle DNA staly populárními jako nevirové vektory pro genoterapii, DNA vakcíny atd.

图片

Obrázek 1. Struktura plazmidové DNA (pDNA) a minicircle DNA (mcDNA)

Rekombinační systémy minicircle DNA

Byly studovány čtyři hlavní rekombinační systémy minicircle DNA in vivo, včetně integrázy fágu λ, rekombinázy Cre fágu P1, resolvázy ParA a PhiC31 integrázy/I-SceI.

Strategie

Integráza fágu λ

Rekombináza Cre fágu P1

Resolváza ParA

PhiC31 integráza/I-SceI

mechanismus

Tyrosinová rekombináza, která funguje prostřednictvím proteinů FIS a IHF a katalyzuje rekombinaci hybridních míst att

Místopřesná tyrosinová rekombináza, která provádí dvousměrnou rekombinaci při vázání na lokální místa loxP

Serininová rekombináza, která provádí nesnívatelnou a jednosměrnou rekombinaci mezi dvěma identickými MRS místy

Serininová rekombináza, která mediuje jednosměrnou rekombinaci mezi vazebnými místy attP/attB, zatímco endonukleáza I-SceI rozkládá produktové im purity a neerekombované rodičovské plazmidy

Vlastnosti

Závisí na výrazu hostitelských faktorů FIS a IHF; vnitřní toxickost; Zbytkové rodičovské plazmidy a mini-plazmidy

Zbytkové rodičovské plazmidy a mini-plazmidy

Vysoký výnos; Zbytkové rodičovské plazmidy a mini-plazmidy

Degradace rodičovského plazmidiu spojená s nižším výkonem

Yaohai Bio-Pharma nabízí kompletní CDMO řešení pro minikruhové DNA
Odkaz:

[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minicircle DNA: Budoucnost pro DNA-bazované vektory? Trends Biotechnol. 2020 Oct;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.

Získejte zdarma nabídku

Get in touch