Rekombinantinis terapijos enzymas
Terapijos enzymai, gauti naudojant biotechnologines procesus, plačiai naudojami klininiais tikslais, įskaitant enzymų pakeitimo terapiją, sudėtinių metabolitų ir toksinių nuolaidą, vėžio gydymą ir genų redagavimą. Keli terapijos enzymai gali būti gaminti mikrobiologiniu išraiškos sistema.
Rekombinantinis enzymas kaip medžiaga
Yra kelios enzymų, naudojamos ilgų koduojančių RNA gamyboje (pvz., mRNA, saRNA, circRNA), antikūnų–gyvulio junginių (ADC) gamyboje ir kitose srityse. Mikroorganizmams gaminti enzymai yra ekonomiškesni nei šešėlinių ląstelių, ypač E. coli išsireiškimo sistema.
|
PROGRAMA
|
Enzymai
|
Funkcija
|
|
Enzymai tiesioginiam RNA gamybai, be RNazės
|
Apribojimo endonukleazos
|
Plazmidinės DNA (pDNA) linearizavimas siekiant išvengti ilgesnio transkripto generavimo.
|
|
T7 RNA polimerazė (T7 RNAP)
|
Prisijungia prie T7 promotoriaus ir generuoja specifinį RNA transkriptą; Vaidina svarbų vaidmenį in vitro transkripcijos (IVT) reakcijoje.
|
|
Vaksinio capping enzymas
|
Įdėda Cap struktūras į IVT mRNA 5′ galus.
|
|
Pirifosfatase, neorganinė (iPPase)
|
Nebepaliko pirifosfato metu IVT reakcijos.
|
|
RNase inhibitorius, rekombinantinis
|
Užkirsti RNase veiklos kelį per IVT reakciją.
|
|
DNase I
|
Pašalinkite DNA šabloną.
|
|
Enzymas cirkulinio RNA gamybai, be RNase
|
RNase R
|
Sudaryti linijinę RNA ir bogauti cikliniuje RNA.
|
|
Enzimo pagrįstas glikano jungimas
|
Peptido N-glikozidazė (PNGase F)
|
Iškiria amido ryšį tarp pirmojo cukraus GlcNAc ir Asn297 šoninio grandinės; Atleisti glikanus iš IgG antikūgulių.
|
|
Bakterinė transglutaminaza (BTG)
|
Konjuguoti apdovanojimus specifiškai prie esamų vietų, kad sukurtų ADC.
|
|
Sortaze A
|
Katalizuoti baltymų jungimąsi.
|
|
β1,4-galaktozidazas
|
Išleisti visus galaktozo galeinius ir sudaryti homogeninį antikūno G0 izoformą.
|
|
β1,4-galaktozo pernašyklio (Gal-T) transferazas
|
Perduoti cukraus dali su chemiškai reaktyviu funkcionaliu grupiu.
|
|
α2,6-sialiltransferazas (Sial T)
|
Įtraukti galeines sialino rūgšties dalis į antikūno natyvios glikano struktūrą.
|
|
Ezymų mediacinis glikano pakeitimas ir glikoinžinerija
|
Endo-N-acetilglukozaminidazas (ENGazas)
|
Hidrolizuoti β1,4-glikozidinį ryšį tarp GlcNAcβ1–4GlcNAc N-glikanų; Pašalinti N-sąryšio glikanus iš IgG antikūnų Fc regiono.
|
|
Endoglikozidazas S (EndoS)
|
|
|
Glikoziferazos (GTs)
|
Perduoti N-glikano oksazonę į defukosintus IgGs.
|
|
Kiti
|
Ezymai, gaminiami mikroorganizmų rūšimi
|
Individualus poreikis
|
Rekombinantinis enzymas kaip reagens
Žymės šalinimo proteazos
Fuzijos žymekliai dažnai naudojami siekiant pagerinti pageidaujamų rekombinantinių baltymų išsidengimą ir stabilumą bei leisti jų lengviau purifikuoti. Populiariausi žymekliai apima His-žymeklį, maltozės jungimo baltmenį (MBP), glutationo-S-transferazę (GST) ir kt.
Įprastai tarp fuzijos žymeklio ir tikslinio baltmens seka yra pridedamas ryšio sekos fragmentas, skirtas žymeklio nuėmimui. Fuzijos žymeklių nuėmimas reikalauja vietinių proteazų, pvz., enterokinazės (EK), trombino, tabakaus šluosties viruso proteazės (TEVp), žmogaus rinito viruso proteazės 3C (HRV3C), mažo ubiquitin modifikavimo baltmens (SUMO) proteazės, tabakaus vamzdinio marmurinimo viruso (TVMV) proteazės ir karboxipeptidazo A/B (CPA/CPB).
|
Tipas
|
Enzymai
|
Atpažinimo vieta
|
|
Žymeklio nuėmimo endoproteazės
|
Enterokinazė (EK), enteropeptidas
|
DDDDK↓
|
|
trombinas
|
LVPR↓GS
|
|
TEV proteazė
|
ENLYFQ↓G
|
|
HRV3C proteazė
|
LEVLFQ↓GP
|
|
SUMO proteazė
|
SUMO tercijinė struktūra
|
|
TVMV proteazė
|
ETVRFQG↓S
|
|
Žymės šalinimo eksoproteazės
|
Karboksipeptidaza A (CPA)
|
Šiaurinio galio aminorūgštys, išskyrus Pro, Lys ir Arg
|
|
Karboksipeptidaza B (CPB)
|
C-terminal Lys ir Arg
|
Kitos proteazės, nukleazės ir amidazės
|
PROGRAMA
|
Enzymai
|
Funkcija
|
|
Kitos proteazės
|
Proteazė K
|
Serinio proteazė, kuri suvargina baltymus hidrolizuodama peptidinius ryšius.
|
|
IdeS, IgG proteazė
|
IgG varginantys enzymai (Ides), kurie skiria tam tikrą vietą imunoglobulino G (IgG), generuojant Fab ir Fc fragmentus
|
|
IgA1 proteazė
|
Proteizinis enzymas, kuris skiria tam tikrą vietą žmogaus imunoglobulino A1 (IgA1) šoninės zonos seka.
|
|
Nukleazė
|
Nukleazė
|
Skiria nukleorūgščių (DNA arba RNA) hidrolizuodamas fosfodiesterinius ryšius.
|
|
Apsričiojantis enzymas
|
Endonukleazė, skirianti DNA arba netoli specifiškų vietų.
|
|
Amidazas
|
PNGase F
|
Skiria tarp vidutinio N-acetilglukozamino (GlcNAc) ir asparagino ramsčių aukštos mannozo, hibridinės ir kompleksinės oligosacharidinės struktūros.
|
Yaohai Bio-Pharma siūlo viso vietoje CDMO sprendimą rekombinantiniams enzymams
Šaltinis:
[1] Hennigan JN, Lynch MD. Enzyme-based terapijų praėjęs, dabartis ir ateitis. Drug Discov Today. 2022 sausis;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
