Pagrindiniai enzymai ilgosios RNA gamybai
mRNA, kaip vienas iš ilgosios koduojančios RNA tipų, veikė saugiai ir efektyviai plačiau asmenų spektre metu COVID-19. Kitos ilgosios koduojančios RNAs, tokios kaip savaiminio pagarsimo RNA (saRNA) ir ciklinė mRNA (circRNA), taip pat parodyjo efektyvumą ankstyvojose klinikinių tyrimų fazėse.
Ilgosios koduojančios RNA masinė gamyba priklauso nuo kelias enzymo reakcijas apimtančio in vitro transkripcijos (IVT). RNA gamybos etapai apima šabloninio DNA paruošimą, IVT RNA sintezę, cirkuliaciją, DNA pašalinimą, RNA modifikaciją (viršūnėjimo ir uodega dėjimui) bei RNA purifikavimą.
Yra keletas pagrindinių enzymų naudojamų ilgosios koduojančios RNA gamyboje (pvz., mRNA, saRNA ir circRNA), įskaitant apribojančius endonukleazuos, T7 RNA polimerazę (T7 RNAP), ribonukleazės inhibitorių, neorganinį pirifosfatázę, DNaze I, vakcininę viršūnėjimo enzimą ir ribonukleazę R.
|
Procesas
|
Enzyme
|
Funkcija
|
|
Šablono DNA paruošimas
|
Apribojimo endonukleazos
|
Plazmidinės DNA (pDNA) linearizavimas siekiant išvengti ilgesnio transkripto generavimo.
|
|
IVT RNA sinteze
|
T7 RNA polimerazė (T7 RNAP)
|
Prisijungti prie T7 promotoriaus ir sugeneruoti specifinį RNA transkriptą; Vaidina svarbų vaidmenį per IVT reakciją.
|
|
RNase inhibitorius, rekombinantinis
|
Užkirsti RNase veiklos kelį per IVT reakciją.
|
|
Pirifosfatase, neorganinė (iPPase)
|
Nebepaliko pirifosfato metu IVT reakcijos.
|
|
DNA šalinimas
|
DNase I
|
Pašalinkite DNA šabloną.
|
|
RNA modifikacija
|
Vaksinio capping enzymas
|
Pridėkite Cap1 struktūras į IVT mRNA 5′ galas.
|
|
2’-O-Metiltransferazė
|
|
circRNA boguotė
|
RNase R
|
Sudaryti linijinę RNA ir bogauti cikliniuje RNA.
|
Yaohai Bio-Pharma siūlo vieną vietą CDMO sprendimą enzymams
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
