Tolesnio proceso (DSP) plėtros reikšmė
Visame fermentacijos sultinyje yra tikslinio baltymo arba plazmidės, taip pat su produktu ir procesu susijusių priemaišų, pvz., agregatų, mikrobinių ląstelių substratų, ląstelių-šeimininkų baltymų (HCP), ląstelės šeimininkės DNR (HCD), endotoksinų ir antibiotikų.
Todėl labai svarbu sukurti veiksmingą DSP, valymo procesą, pašalinti tam tikras priemaišas ir gaminti labai išgrynintą ir aukštos kokybės vaistinę medžiagą. Be to, valymo proceso optimizavimas gali padėti padidinti produkto atgavimą, sumažinti išlaidas ir pagerinti proceso mastelį bei atkuriamumą.
Raktiniai žodžiai: proceso kūrimas, optimizavimas ir patvirtinimas, gryninimo procesas, chromatografija, priemaišų šalinimas, HCP pašalinimas, HCD pašalinimas, endotoksinų pašalinimas, baltymų denatūravimas ir perlankstymas, VLP surinkimas, konjugacija
Taikymas: Biofarmacijos pramonė, žmonių medicina, gyvūnų medicina, vakcina, rekombinantiniai didelės molekulės biologiniai preparatai, rekombinantiniai biologiniai preparatai, biologinis reagentas
Yaohai Bio-Pharma DSP sprendimai
Mes turime didelę patirtį atskiriant tikslinius baltymus ar plazmides iš sudėtingų matricų, kurdami ir optimizuodami tolesnio valymo procesą. Yra įvairių tipų vienetų, tinkamų biologiniams preparatams valyti, įskaitant centrifugavimą, filtravimą, homogenizavimą, šarminę lizę, ultrafiltravimą, nusodinimą, baltymų denatūravimą ir perlankstymą, chromatografiją ir kt.
Mūsų siūlomos valymo kūrimo paslaugos apima:
- Viso valymo proceso sukūrimas nuo ląstelių arba supernatantų surinkimo iki galutinio aktyvaus ingrediento.
- Valymo proceso optimizavimas, remiantis su produktu ir procesu susijusiomis priemaišomis, siekiant padidinti produkto kokybę ir saugą, pvz., HCP, HCD, endotoksinus.
- Pagrindinių parametrų apibrėžimas ir optimizavimas atliekant vieną ar kelias vieneto operacijas, įskaitant ląstelių lizę, tangentinį srauto filtravimą, dervos atranką, chromatografiją, baltymų denatūravimą ir perlankstymą ir kt.
- Proceso optimizavimas kokybės, derlingumo, regeneravimo, sąnaudų ir mastelio požiūriu.
- Tolesnio valymo proceso patvirtinimas.
- Rizika pagrįstas parametrų diapazono vertinimas ir eksperimentų planavimas (DoE) procesų modeliavime.
Informacija apie paslaugą
Standartizuotos baltymų arba plazmidės gryninimo platformos yra pagrįstos keliais neapdorotais gryninimo etapais ir mažiau nei 4 chromatografijos etapais, įskaitant surinkimą, tarpinį gryninimą ir poliravimą.
| Informacija apie paslaugą |
Vieneto operacijos |
Parametrai |
| Neapdorotas valymas |
Centrifugavimas |
Sukimosi greitis, laikas |
| Aukšto slėgio homogenizacija |
Bendras kietosios medžiagos kiekis, slėgis, ciklai |
| Nuolatinė šarminė lizė |
Resuspenduotų ląstelių ir lizės tirpalo santykis, lizės laikas |
| Tangentinio srauto filtravimas |
Membranos medžiaga ir porų dydis, tiekimo srauto greitis transmembraninis slėgis (TMP), filtro tūrio ir membranos ploto santykis |
| Krituliai |
Nuosėdų tipas ir koncentracija, priedas, pH, temperatūra, laikas |
| Denatūravimas ir perlankstymas |
Inkliuzinio kūno baltymų tirpinimas |
Denatūruojančios medžiagos (pvz., karbamidas, guanidino HCl, stiprus joninis ploviklis), plovikliai (pvz., natrio dodecilo sulfatas, SDS), reduktoriai (pvz., ditiotreitolis, DTT), kompleksonai (etilendiaminotetraacto rūgštis, EDTA), temperatūra, laikas |
| Baltymų perlankstymas |
Perlankstymo metodai (skiedimas, dializė arba SEC perlankstymas), baltymų koncentracijos, buferiai, pH, temperatūra, laikas, oksidatoriai ir reduktoriai (pvz., glutationas, GSH/oksiduotas glutationas, GSSH, DTT/GSSH, cisteinas/cistinas), mažieji moleculės priedai. (L-argininas, karbamidas, guanidinas / HCl ir plovikliai) |
| Užfiksavimas, tarpinis valymas ir poliravimas |
AC (afinitetinė chromatografija) |
Kelių tipų chromatografinė derva / kolonėlė (pvz., AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), kolonėlės ilgis ir skersmuo, buferio sudėtis, įpurškimo tūris, judriosios fazės sudėtis (adsorbcija ir desorbcija), pH, srauto greitis, surišimas, Skalbimo ir eliuavimo sąlygos. |
| IEX (anijonų arba katijonų mainų chromatografija) |
| HIC (hidrofobinės sąveikos chromatografija) |
| Druskos pašalinimo ir (arba) dydžio išskyrimo chromatografija (SEC) |
| RPC (atvirkštinės fazės chromatografija) |
| MMC, mišraus režimo chromatografija |
Atvejo analizė
Byla 1
Mums pavesta sukurti ir optimizuoti tolesnio valymo procesą, kad baltymų grynumas padidėtų nuo 85% iki 90%, kartu sumažinant chromatografijos etapus.
„Yaohai“ pristatė tvirtą ir keičiamo dydžio gryninimo procesą su 3 chromatografijos etapais tiksliniam baltymui – bakterinei alergijai. Ir galutinis grynumas pasiekė 95%.
Byla 2
Yaohai mūsų klientas paskyrė optimizuoti į virusą panašių dalelių (VLP) vakcinos endotoksinų pašalinimo procesą.
Mūsų komanda atliko chromatografijos parametrų optimizavimą ir paruošė vaistinę medžiagą, kurios grynumas 98%, o endotoksino likutis 12.8EU/mg.
Mūsų patirtys
- Dalyvavome kuriant ir gaminant įvairias dideles molekules, įskaitant rekombinantines subvienetines vakcinas, VLP, hormonus (insuliną, GLP-1, augimo hormoną), citokinus (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21). ), augimo faktoriai (EGF, FGF, NGF), nanokūnai/vieno domeno antikūnai (sdAb), fermentai ir kt.
įranga
Naudojame pramonėje pirmaujančias AKTA Pure, AKTA Avant ir Preparative HPLC sistemas įvairiems chromatografijos metodams, įskaitant afinitetą, jonų mainus, hidrofobinę sąveiką, atvirkštinės fazės ir dydžio išskyrimo chromatografiją, atlikti.
LT
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
