N-glikanų profiliavimas yra būtinas biomedicininėms gaminiams gaminti. Yaohai Bio-Pharma siūlo N-glikanų profiliavimo paslaugą naudojant išleistus ir pažymėtus glikanus su Skystuoju Chromatografija-Masės Spektrometrija (LC-MS). Bendrai, N-glikanų preparavimo etapai apima glikoproteino (GP) sutrikdymą, nuo glikacijos atskyrimą, šalinimą, pažymėjimą/derivaciją ir Sąvartiose Fazės Ekstrakciją (SPE).
Mes esame įsitraukę į įvairių didelių molekulių, įskaitant rekombinantinius subvieninius vakcinos, nanotiklius/VHHs/ vienvietinius antikūno kūnus (sdAbs), antikūno fragmentus, hormonus/peptidus, citokinus, augimo veiksnius (GF), enzymus, kolagenus ir kt., baltymų struktūrinę charakteristiką.
Reguliacinės reikalavimai dėl N-Glikanų Profiliavimo
Pagal ICH Q6B rekomendaciją, „dėl glikoproteinių nustatoma angliavandenių turinys (neutralūs angliavandeniai, aminio angliavandeniai ir sialinio rūgštis). Be to, analizuojama angliavandenio grandinių struktūra, oligosacharidų šablonas (antenos profilius) ir polipeptido grandinės glikozacijos vietos laipsniu, kiek tai yra galima.“
Analizinis metodas
| Analizė |
Metodai |
| N-glikano Profilis |
Atleistų ir pažymėtų glikanų skaitmeninė duomenų analizė su Likvidaus chromatografijos-Masės spektrometrijos (LC-MS) metodu |
Procedūros
1. Enziminis glikanų atleidimas naudojant Peptido N-Glikozidazę F (PNGase F)
2. Atleistų glikanų derivacinimas naudojant 2-aminobenzamidą (2-AB)
3. Surinktų N-glikanų purifikacija ant TSK Amide - 80 stulpelio, jei yra dideli detergenterių, nevulkaninių druskų ar medžiagų su laisvais aminio grupėmis kiekių
4. Pažymėjimas fluorescencine 2-aminobenzamidu (2-AB)
5. Pažymėtų N-glikanų LC-MS analizė
6. Duomenų analizė
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
