Perstatinių baltymų atveju dažnai matome atvirų aminorūgščių šoninės grandinės oksidaciją, pvz., triptofano (Trp) ir metionino (Met), dėl kurios keičiasi baltymų fizikinės ir cheminės savybės. Šie pokyčiai gali paskatinti biologinių funkcijų pakeitimus paveiktuose baltymuose, pvz., saujos praradimą, veislumo sumažėjimą, netikėtai greitą išvalymo procesą. Baltymai yra svarbūs oxidacinių reakcijų objektai, nes jie reaguojama greitai su oksidantais ir yra daugialypūs ląstelėse, ekstercelulinėse audiniuose ir kūno skysčiuose.
Taigi, baltymų oksidacijos stebėjimas yra kritinis sėkmingam biomedicinos produkto kūrimui.
Yaohai Bio-Pharma siūlo aminorūgščių oksidacijos analizės paslaugą, leidžiančią nustatyti aminorūgščių oksidaciją skaitmenine chromatografija su masės spektrometru (LC-MS).
Mes esame įsitraukę į proteino struktūros charakteristiką įvairių didelių molekulių, įskaitant rekombinuotus subvieneto vakcinos, nanotiklius / VHHs / vienvietinius tikrinius (sdAbs), antikūnies fragmentus, hormonus / peptidus, citokinus, augimo veiksnius (GF), enzymus, kolažinus ir kt.
Reguliminiai reikalavimai aminorūgščių oksidacijai
Pagal ICH Q6B gairis, oksiduotos formas galima aptikti ir charakterizuoti chromatografine, elektroforetine ir / arba kitomis relevantiomis analizinėmis metodikomis (pvz., Aukštos našumo skilties skysčio chromatografija (HPLC), kapiliorinė elektroforezė, masės spektrometriją, ciklinę dichroidiją).
Analizinės metodai
| Analizė |
Metodai |
| Aminorūgščių Oksidaciją |
LC-MS, atvirkštine fazių aukštos našumo skilties skysčio chromatografija (RP-HPLC) arba hidrofobinės sąveikos aukštos našumo skilties skysčio chromatografija (HIC-HPLC) bei masės spektrometriją |
Analiziniai procedūros
1. Probeno paruošimas
2. LC-MS
3. Duomenų analizė
Tryptofano (Trp) residuai ypač linkę oxidacijai dėl aukštos aromatinio indolo reaktyvumo su reaktyviais deguonies rūšiais. Trp oxidacijai reikia tam tikro Trp residų iškilo, kurie paprastai yra uždengti proteino trimačioje sandaros viduje.
Tačiau, kai Trp residuai oxiduojami, jie gali paverstis į įvairius produktus, kurie turi labai skirtingas savybes nuo pradinio Trp. Populiariausias Trp oxidacijos kelias apima N-formilkinurineno formavimą (Masės skirtumas: +32).
Kitas dažnai oxiduojamas aminorūgštis yra metioninas. Metionino residuojo šilis atomas gali priimti vieną ar du deguonies atomus, kad sukurtų sulfoksidą (Masės skirtumas: +16) arba sulfoną (Masės skirtumas: +32), atitinkamai. Ši modifikacija yra visiškai paplitusi dėl tipiškai aukštos Met paviršiaus iškilimo.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
