mRNR buvo plačiai naudojama tiriant genų ar baltymų funkcijas. Tuo tarpu tai įprasta kuriant profilaktinius ir gydomuosius biologinius preparatus. Kaip įprasta RNR molekulių sintezės strategija, in vitro transkripcija (IVT) leidžia efektyviai gauti pritaikytus nuorašus.
„Yaohai Bio-Pharma“ sukūrė mRNR sintezės technologijų rinkinį, kad pateiktų aukštos kokybės RNR, pvz., sekos projektavimą ir optimizavimą, IVT, gryninimą, liofilizavimą ir lipidų nanodalelių (LNP) kapsuliavimą. Visi produktai išleidžiami pagal griežtus kokybės kontrolės (QC) standartus.
19 m. prasidėjus COVID-2020 pandemijai, mRNR technologija labai pažengė į priekį, o su ja susiję tyrimai ir taikymas įgijo precedento neturintį vystymąsi, įskaitant profilaktines vakcinas infekcinių ligų profilaktikai, gydomąsias onkologines vakcinas ir vaistus, navikų terapiją, baltymus. pakaitinė terapija, regeneracinė medicina ir ląstelių bei genų terapija (CGT).
mRNR vakcina | mRNR terapija |
|
Procesas | Pasirenkama paslauga | Informacija apie paslaugą | Pristatymo laikotarpis (darbo diena) | Pristatoma |
mRNR sekos projektavimas ir optimizavimas | Kodavimo sekų projektavimas ir optimizavimas | CDS sekos projektavimas ir kodono optimizavimas | 1-3 | Sekos failas |
Nekoduojančių sekų projektavimas ir optimizavimas | UTR, polyA sekų projektavimas ir optimizavimas | |||
Transkripcijos šablono plazmidės paruošimas | Rekombinantinės plazmidės preparatas | Genų sintezė | 7-10 | |
Plazmidžių amplifikacija ir ekstrahavimas | 4 | |||
Plazmidžių tiesinimas ir gryninimas | ||||
mRNR in vitro transkripcija | Bendras transkripcijos apribojimas (vieno etapo metodas) | In vitro transkripcija (IVT) / Cap analogas | 1-2 | N / A |
Nukleotidų modifikacijos (UTP/CTP modifikacijos) | ||||
DNR šablono pašalinimas (DNazė I) | ||||
Fermentinis ribojimas (dviejų etapų procesas) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotidų modifikacijos (UTP/CTP modifikacijos) | ||||
DNR šablono pašalinimas (DNazė I) | ||||
mRNR valymas (ličio chloridas / magnetinės granulės) | ||||
Fermentinis dangtelis | ||||
mRNR valymas | Įprasta valymo schema | Ličio chlorido nusodinimas | 1 | mRNR vaistinė medžiaga |
Magnetinių karoliukų valymas | ||||
Chromatografinės kolonėlės gryninimo schema | Kelių chromatografijos metodų derinys | 1-2 | ||
Buferio keitimas | Ultrafiltracija | 1 | ||
mRNR liofilizavimas | Liofilizavimas | Išankstinis užšaldymas | 2-3 | mRNR liofilizuoti milteliai |
Pirminis džiovinimas (sublimacija) | ||||
Antrinis džiovinimas (desorbcija) | ||||
mRNR kapsuliavimas | LNP inkapsuliacija | LNP inkapsuliacija | 2-3 | mRNR-LNPDvaisto produktas |
Koncentracija ir buferio mainai | ||||
mRNR kokybės analizė | mRNR vaistinė medžiaga / liofilizuoti milteliai | Koncentracija, grynumas | 1 | Testo ataskaita |
Vientisumas, uždengimo efektyvumas, poliA uodegos paskirstymas | 2-5 | |||
mRNR-LNP vaisto produktas | Inkapsuliavimo efektyvumas | 1 | ||
Dalelių dydis ir pasiskirstymas | ||||
Paviršinis krūvis | ||||
mRNR ekspresijos patvirtinimas | 293T ląstelių įvertinimas | Ląstelių padengimas | 4 | |
Laikina ląstelių transfekcija | ||||
Fluorescencinio signalo stebėjimas | 1-3 | |||
Western blot (WB) / su fermentais susietas imunosorbentinis tyrimas (ELISA) |
5' Cap |
▪ Neuždengtas ▪ Cap0, kartu su dangteliu ▪ Cap1, kartu su dangteliu ▪ Cap1, fermentinis dangtelis |
5' UTR/3' UTR |
▪ Gamtos UTR seka ▪ Mutant / Engineered UTR seka |
3' PolyA Tail |
▪ 100A ~120A uodega (rekomenduojama) ▪ Segmentuota poliA uodega ▪ Kitos individualizuotos uodegos |
Modifikuoti nukleozidai |
▪ Nepakeistos bazės ▪ Pseudouridinas (Ψ) ▪ N1-metilseudouridinas (N1Ψ) ▪ 5-metilcitozinas (m5C) ▪ 5-metiluridinas (m5U) ▪ 5-metoksiuridinas (5 mln. TV) ▪ 2-tiouridinas (s2U) ▪ 2′-O-metil-U ▪ Kiti pakeitimai |
Integruotas paslaugų srautas
Teikti daugybę paslaugų nuo priekinės sekos projektavimo iki galinio mRNR paruošimo, kokybės kontrolės ir išraiškos patvirtinimo.
Tarptautinis pažangiausias sekos projektavimas ir optimizavimas
Profesionalus mRNR sekos projektavimas ir optimizavimas palengvina efektyvią mRNR ekspresiją.
Įvairios nukleotidų modifikacijos
Efektyviai padidinkite mRNR ekspresiją ir sumažinkite neigiamą mRNR imuninį atsaką.
Brandaus valymo platforma
Derinant įprastą ir pačių sukurtą gryninimo metodą, gaunami didelio grynumo mRNR mėginiai
Pilna kokybės kontrolės platforma
Praturtinkite QC parinktis, kad atitiktų įprastų bandymų, pvz., koncentracijos, A260/280 grynumo ir vientisumo, reikalavimus, taip pat aukštus kokybės kontrolės reikalavimus, pvz., ribojimo efektyvumą / poliA paskirstymą.
Greitas pristatymas
Individualizuota mRNR gali būti pristatyta net per 7 dienas, išskyrus užsakomąją sekų sintezę.