CircRNA paruošimui reikalingas linijinis RNA kaip ciklizacijos prekursorius (RNA prekursorius), kurį paprastai gaminama naudojant linearizuotą plazmidinę DNA kaip transkripcijos šabloną ir in vitro transkribuojant su T7 RNA polimeraze.
Aukštos kokybės plazmidinė DNA yra būtina in vitro transkripcijai (IVT). Remiantis pažangia plazmidinės DNA paruošimo platforma, Yaohai Bio-Pharma gali teikti aukštos rūgšties ir standartinę linearizuotą plazmidinę DNA (pDNA) paruošimo paslaugą, užtikrinančią IVT produktų integritetą.
Paslaugų detalės
| Procesas |
Neprivalomas Paslauga |
Paslaugų detalės |
Pristatymo Laikotarpis (darbo diena) |
| Ciklinio plazmido paruošimas |
Geno sintezė |
Genų sintezė (Trečiosios šalies) |
7-10 |
| Plazmido pagarsinimas |
Plazmido pagarsinimas |
2 |
| Plazmido ištraukimas |
| Linijinio plazmido paruošimas |
Plazmidinio linearizavimas ir purifikavimas |
Plazmido linijinimas |
1 |
| DNA linijinimo šalinimas |
| Plazmidinės DNA kokybės kontrolė |
Konscentracijos švarumas |
Ultravioletinė (UV) spektrofotometrija |
1-2 |
| Plazmido konformacija |
Agaroidinio Gelo Elektroforezė (AGE) |
| Kapilinė elektroforezė (CE)-pasirinktinai |
| Plazmido identifikavimas |
Ribonukleaza identifikavimas / AGE |
Mūsų ypatybės
- Nemokamas kirtinamas plazmidinis šablonas
Linerizacijos metodu lankstus pasirinkimas
- Aukštas atgavimo rodiklis
Optimizavimas DNS ištraukimo ir taisyklinimo metodams, siekiant aukštių grąžos rodiklių.
- Griežtas kokybės kontrolė
Griežtos procesų kontrolės standartai, su plazmidinių imčių superhelikalios konformacijos norma tyrimams daugiau nei 80%.
- Išsiskirianti Platforma Procesas
Aukštojo standarto ir efektyvūs plazmidinių nusparčių parengimo bei kokybės kontrolės paslaugos, atitinkančios eksperimentinius poreikius.
Praktinis pavyzdys
Paimus Yaohai Bio-Pharma produkto mCherry circRNA pavyzdį, transkripcijos šabloninės plazmidinės imties (tyrimo klasės) superlankstis santykis yra daugiau nei 70%, o liniarizacijos lygis artimas 100%.
mCherry circRNA pagotina liniarizuotu plazmidu kaip šablonu ir perkeliama į 293T ląstelę. Po 24 valandų perkėlimo aptinkamas aukštas fluorescencijos išraiškos lygis (raudona fluorescencija), kuris po 48 valandų bus stiprinamas, o galima jį aptikti dar 7-osios ir 14-osios dienos po perkėlimo.
mCherry белка stabiliai ir efektyviai išsiskleidžia, o transkripcinio šablono garsumas gali atitikti aukštos kokybės circRNA vaistinių produktų (DP) reikalavimus.
MCherry circRNA in vitro išsiskleidimo patvirtinimas
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
