Glutaminio ir asparagino rinkmenų deamidacijos yra paplitusios modifikacijos, kuri turėtų poveikį białiedžių biomedžiagų savybėms. Deamidacija gali vykti glutaminio amonio atlikuose, bet paprastai daug lėčiau. Deamidacijos greičiai priklauso nuo temperatūros, pH, vietinės białiedžio struktūros ir aplinkinių aminorūgščių atlikų.
Yaohai BioPharma siūlo aminorūgščių deamidacijos tyrimo paslaugą, kuria galima aptikti aminorūgščių deamidaciją skaitmenine chromatorgrafija su masės spektrometriu (LC-MS).
Mes esame įsitraukę į įvairių didelių molekulių białiedžių struktūros charakteristiką, įskaitant rekombinantinius subvakuolius, nanokūlius/VHHs/ vienatvarkesnius kūlius (sdAbs), antikūnų fragmentus, hormonus/peptido, citokinus, augimo veiksnius (CF), enzymus, kolagenus ir kt.
Reguliuojamos reikalavimai dėl aminorūgščių deamidacijos
Pagal ICH Q6B gairių, deamiduotosios formos gali būti aptiklos ir charakterizuojamos chromatografine, elektroforetine ir/arba kitomis relevantiomis analizinėmis metodikomis.
Analizinės metodai
| Analizė |
Metodai |
| Deamidacija |
Skystojo chromatografinio-masyvometrinio metodu (LC-MS) |
Procedūros
pvz., asparagino deamidacija
1. Enzyminė sukapavimo procedūra
2. LC-MS aukštos našumo skystojo chromatografinio (HPLC) sąlygomis
3. Duomenų analizė
Asparagino deamidacija vyksta per sukcinimidą tarpinią (Suc), kuris yra jautrus racemizacijai ir hidroliziui, gaunant keturis Asp izomerus, įskaitant L-Asp, L-IzoAsp, D-Asp ir D-IzoAsp.
Teorijoje glutaminamo deamidacija gali sukelti keturis atitinkamus Glu izomerus per procesą panašų į Asn deamidaciją.
Aukštosios sprendiamosios galios masės spektrometrijos lengvai nustato 1-Da masės skirtumą tarp peptidų, turinčių Asn/Gln, ir jų atitinkančių deaminuotų analogių Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
