Įtempimo atrankos reikšmė
Norint sukurti biologinius CMC, būtina atrinkti tinkamus šeimininkus, kurie lemia produkto ir gamybos proceso kokybę bei nuoseklumą. Tiesioginis šeimininko atrankos tikslas yra pateikti kandidatą į pirminį ląstelių banką (PCB), turintį aukštą ekspresijos lygį ir didelį stabilumą tiek praėjimo stabilumo, tiek saugojimo stabilumo požiūriu. Tinkamo šeimininko patikrinimas būtinas dėl dviejų pagrindinių priežasčių:
- Pirma, pasirinkti mikrobų šeimininką, turintį aukštą ekspresijos lygį. Yra keletas komerciškai prieinamų padermių, kurios naudojamos įvairių tipų baltymams, pavyzdžiui, toksiniams, tirpiems baltymams ar eukariotų baltymams, ekspresuoti.
- Antra, patikrinti šeimininką su genetiniu stabilumu. Genetinio stabilumo tyrimai yra pagrindinis dalykas per visą gamybos gyvavimo ciklą. Siūloma, kad didelis genetinis stabilumas yra dar viena pagrindinė tinkamos padermės savybė.
Raktiniai žodžiai: mikrobų padermių atranka, mikrobų padermių atranka, didelio našumo bakterijų ar mielių atranka, didelio produktyvumo padermių atranka, labai stabilių padermių atranka, genetiškai stabilios padermės atranka Taikymas: žmonių medicina, gyvūnų medicina, vakcina, sintetinė biologija, rekombinantinė didelė molekulė biologiniai preparatai, biologinis reagentas
Yaohai Bio-Pharma padermių patikros paslaugos
Turėdami daugiau nei 10 metų CDMO patirtį mikrobų biologijos srityje, palaikome įvairių didelių molekulių, įskaitant rekombinantines subvienetines vakcinas, į virusus panašias daleles (VLP), hormonus (insuliną, GLP-1, augimo hormoną), citokinus, kūrimą ir gamybą. Interleukinas-2/IL-2, IL-15, IL-21), augimo faktoriai (EGF, FGF, NGF), nanokūnai/vieno domeno antikūnai (sdAb), fermentai ir kt.
Esame sukaupę daug patirties atrenkant įvairių tipų plazmidinius vektorius ir mikrobų šeimininkus, įskaitant bakterijas. Escherichia coli (E. coli), ir mielės Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Mes galime rasti geriausią išraiškos sistemą jūsų unikaliems biologiniams preparatams.
Mes surinkome įvairius mikrobų šeimininkus su aiškiais šaltiniais ir standartiniu CoA, įskaitant E.coli išraiška ir mielių išraiška.
Informacija apie paslaugą
|
Paslaugos
|
Informacija apie paslaugą
|
Minimali laiko juosta / diena
|
Pristatomos
|
|
Padermės konstrukcija (E. coli)
|
Plazmidės transformacija (keli šeimininkai)
|
5
|
Komercinių šeimininkų COA Padermės statybos ataskaita
|
|
PCR patikrinimas
|
|
Padermės valymas
|
|
Padermės išsaugojimas
|
|
Padermės konstrukcija (mielės)
|
Kompetentingų mielių ląstelių paruošimas
|
10
|
|
Plazmidžių linijavimas
|
|
Elektros transformacija
|
|
Atsparumo / mitybos trūkumo patikra
|
|
Padermės valymas
|
|
Padermės išsaugojimas
|
|
Tinkamo šeimininko patikrinimas
|
Plazmidės arba genomo DNR ekstrahavimas
|
15-20
|
Šeimininko atrankos procesas Sukurtų padermių COA
|
|
PGR patikrinimas, restrikcijos fermentų virškinimas
|
|
Tikslinių genų sekos nustatymas
|
|
Aukštos išraiškos šeimininkų atranka
|
|
Genetinio stabilumo šeimininkų atranka
|
|
Padermės išsaugojimas
|
Atvejo analizė
Tinkamas šeimininkas pagerina baltymų ekspresijos lygį 2.5 karto.
Mums pavesta sukurti aukštos produkcijos E. coli įtempti. O mes išbandėme trijų rūšių reklamą E. coli šeimininkai, remiantis tikslinio baltymo savybėmis. Parodyta, kad padermė S1-1 ir S1-2 (A pav.: 1,2, 3.5 juosta) pagerino baltymų kiekį iki 3 karto nei kliento pradinė padermė (A pav.: XNUMX juosta).
Be to, padermė S1-1 pasižymėjo dideliu genetiniu stabilumu (B pav.) ir buvo pripažinta pirminės ląstelių bankininkystės (PCB) kandidate.
Mūsų paslaugų ypatybės
Įrodyta patirtis dirbant su įvairiais mikrobų šeimininkais, pvz. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink padermė 1/2/3/4; S.cerevisiae ir H. polymorpha.
Esame patyrę E. coli periplazminė sekrecija, tirpaus ir inkliuzinio kūno ekspresija, taip pat mielių tarpląstelinė ar sekrecijos ekspresija. Nepridedame antibiotikų arba pridedame antibiotikų pagal teisės aktų nurodymus.
Mes sukuriame didelio našumo atrankos platformą, skirtą didelio produktyvumo ir stabilių padermių atrankai iš daugiau nei šimto kandidatų.
Užtikrinama, kad padermių inžinerijos ir atrankos procesas būtų atsekamas, laikantis gero duomenų ir įrašų valdymo.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
