A Minicircle DNS (mcDNS) egy kisebb, nem vírusos DNS-vektor, amely szülői plazmid DNS-szerű szerkezetből származik. A minikör DNS abban különbözik a hagyományos plazmid DNS-től, hogy tartalmazza a promotort és az érdeklődésre számot tartó gént (GOI), replikációs origó (ORI) és szelekciós marker (selMark) nélkül. A minicircle DNS-t baktériumokban állítják elő in vivo rekombinációval, hogy eltávolítsák a plazmid DNS-ből extra szekvenciákat (úgynevezett miniplazmidokat). Biztonsága miatt a minicircle DNS népszerűvé vált, mint nem vírusos vektor génterápiához, DNS-vakcinákhoz stb.
1. ábra: A plazmid DNS (pDNS) és a minicircle DNS (mcDNS) szerkezete
Minikör DNS-rekombinációs rendszerek
Négy fő minikör DNS in vivo rekombinációs rendszert vizsgáltak, köztük a λ fág integrázt, a P1 Cre fág rekombinázt, a ParA rezolvázt, a PhiC31 integra se/I-SceI-t.
|
Stratégia
|
λ fág integráz
|
P1 Cre fág rekombináz
|
ParA rezolvase
|
PhiC31 integra se/I-SceI
|
|
Szerkezet
|
A tirozin rekombináz, amely a FIS és IHF fehérjéken keresztül katalizálja az att hibrid helyek rekombinációját
|
Helyspecifikus tirozin rekombináz, amely kétirányú rekombinációt hajt végre, amikor loxP helyekhez kötődik
|
Szerin-rekombináz, amely irreverzibilis és egyirányú rekombinációt hajt végre két azonos MRS-hely között
|
A szerin rekombináz, amely egyirányú rekombinációt közvetít az attP/attB kötőhelyek között, míg az I-SceI endonukleáz hasítja a termékkel kapcsolatos szennyeződéseket és a nem rekombinált szülői plazmidot
|
|
Jellemzők
|
A FIS és IHF gazdafaktorok expressziójától függ; belső toxicitás; Maradék szülői plazmid és miniplazmid
|
Maradék szülői plazmid és miniplazmid
|
Magas hozam; Maradék szülői plazmid és miniplazmid
|
A szülői plazmid lebomlása csökkenti a hozamot
|
A Yaohai Bio-Pharma egyablakos CDMO-megoldást kínál a Minicircle DNS-hez
Referencia:
[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minikör DNS: A DNS-alapú vektorok jövője? Trends Biotechnol. 2020. október;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEM
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
