Kulcsenzimek a hosszú RNS-termeléshez
Az mRNS, mint a hosszú kódoló RNS egy típusa, biztonságosan és hatékonyan működött az emberek szélesebb körében a COVID-19 során. Más, hosszú kódoló RNS-ek, mint például az önamplifikáló RNS (saRNS) és a cirkuláris mRNS (circRNS) szintén hatékonynak bizonyultak a preklinikai és klinikai vizsgálatokban.
A hosszú kódoló RNS nagy léptékű termelése in vitro transzkripción (IVT) alapul, számos enzimatikus reakcióval. Az RNS-termelés lépései közé tartozik a templát DNS-előállítás, az IVT RNS-szintézis, a keringés, a DNS-eltávolítás, az RNS-módosítás (sapkázás és a farokképzés), valamint az RNS-tisztítás.
Számos kulcsfontosságú enzimet használnak a hosszú kódoló RNS-termelésben (pl. mRNS, saRNS és cirRNS), beleértve a restrikciós endonukleázokat, a T7 RNS polimerázt (T7 RNAP), az RNáz inhibitort, a szervetlen pirofoszfatázt, a DNáz I-et, a vaccinia capping enzimet és az RNáz R-t.
|
folyamat
|
Enzim
|
Funkció
|
|
Templát DNS előkészítése
|
Restrikciós endonukleázok
|
A plazmid DNS (pDNS) linearizálása a hosszabb transzkriptum létrehozásának elkerülése érdekében.
|
|
IVT RNS szintézis
|
T7 RNS polimeráz (T7 RNAP)
|
Kötődik a T7 promoterhez, és specifikus RNS-transzkriptumot hoz létre; Kulcsszerepet játszanak az IVT reakció során.
|
|
RNáz inhibitor, rekombináns
|
Gátolja az RNáz aktivitást az IVT reakció során.
|
|
Pirofoszfatáz, szervetlen (iPPase)
|
Kerülje el a pirofoszfát kialakulását az IVT reakció során.
|
|
DNS eltávolítás
|
DNáz I
|
Távolítsa el a DNS-sablont.
|
|
RNS módosítás
|
Vaccinia capping enzim
|
Adjunk hozzá Cap1-struktúrákat az IVT mRNS 5'-végeihez.
|
|
2'-O-metil-transzferák
|
| cirRNS dúsítás |
RNáz R |
Emésztse meg a lineáris RNS-t és dúsítsa fel a körkörös RNS-t. |
A Yaohai Bio-Pharma egyablakos CDMO-megoldást kínál az enzimek számára
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEM
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
