Címkeeltávolító proteázok
A rekombináns fehérjék oldhatóságának javítása és a tisztítási folyamat egyszerűsítése érdekében a kutatók általában fúziós címkéket adnak hozzá, amelyek közül általában a His-címkét, a maltóz-kötő fehérjét (MBP) és a glutation-S-transzferázt (GST) használják.
Miközben extra fehérjeszekvenciaként van megjelölve, el kell távolítani a biológiai aktivitás fenntartása érdekében a gyógyszeriparban. A fúziós címkék eltávolításához helyspecifikus proteázokra van szükség, mint például enterokináz (EK), trombin, dohánymarás vírus proteáz (TEVp), humán rhinovírus proteáz 3C (HRV3C), kis ubiquitin módosító fehérje (SUMO) proteáz, dohányvéna foltosodás vírus ( TVMV) proteáz és karboxipeptidáz A/B (CPA/CPB).
típus
|
Enzim
|
Felismerési oldal
|
Címkeeltávolító endoproteázok
|
Enterokináz (EK), Enteropeptidáz
|
DDDDK↓
|
A trombin
|
LVPR↓GS
|
TEV proteáz
|
ENLYFQ↓G
|
HRV3C proteáz
|
LEVLFQ↓GP
|
SUMO proteáz
|
SUMO tercier szerkezet
|
TVMV proteáz
|
ETVRFQG↓S
|
Címkeeltávolító exoproteázok
|
Karboxipeptidáz A (CPA)
|
C-terminális aminosavak, kivéve a Pro, Lys és Arg
|
Karboxipeptidáz B (CPB)
|
C-terminális Lys és Arg
|
Egyéb proteázok
Alkalmazás
|
Enzim
|
Funkció
|
Egyéb proteázok
|
Proteáz K
|
Szerin-proteáz, amely peptidkötések hidrolizálásával emészti fel a fehérjéket.
|
IdeS, IgG proteáz
|
IgG-t lebontó enzimek (Ides), amelyek az immunglobulin G (IgG) meghatározott helyén hasítanak, és Fab és Fc fragmentumokat hoznak létre
|
IgA1 proteáz
|
Proteolitikus enzim, amely a humán immunglobulin A1 (IgA1) csuklórégió szekvenciájának specifikus helyét hasítja.
|
Nukleáz
Alkalmazás
|
Enzim
|
Funkció
|
Nukleáz
|
Nukleáz
|
A nukleinsavakat (DNS vagy RNS) hasítja a foszfodiészter kötések hidrolizálásával.
|
Az enzim korlátozása
|
Egy endonukleáz, amely meghatározott helyeken vagy azok közelében hasítja a DNS-t.
|
amidáz
Alkalmazás
|
Enzim
|
Funkció
|
amidáz
|
PNGase F
|
Hasít a magas mannóztartalmú, hibrid és komplex oligoszacharidok legbelső GlcNAc- és aszparagin-maradékai között.
|
A Yaohai Bio-Pharma egyablakos CDMO-megoldást kínál az enzimes reagensekhez