A Minicircle DNA (mcDNA) egy kisebb, nem vírusos DNA vektor, amely a szülő plazmid-DNA szerkezetéből ered. A Minicircle DNA attól tér el, hogy tartalmazza a promotorokat és az érdeklődési génet (GOI)-t, de nem tartalmazza a replikációs eredetét (ORI) és a kiválasztási jelölőt (selMark). A Minicircle DNA baktériumokban termelik meg élőben történő rekombináció révén, amely eltávolítja a további sorozatokat (mini-plazmid néven ismert) a plazmid-DNARól. Biztonsága miatt a Minicircle DNA népszerűséget nyerte a nem vírusos vektorok között a génterápia és a DNS-oltalom területén stb.

Ábra 1. Plazmid-DNA (pDNA) és Minicircle DNA (mcDNA) szerkezete
Minicircle DNA rekombinációs rendszerek
Négy fő Minicircle DNA élő rekombinációs rendszer került tanulmányozás alá, beleértve a Phage λ integrázát, a Phage P1 Cre rekombinázát, a ParA resolvázát, PhiC31 integrázát/I-SceI-t.
Stratégia
|
Phage λ integráz
|
Phage P1 Cre rekombináz
|
ParA resolváz
|
PhiC31 integráz/I-SceI
|
mechanizmus
|
A tyrosin rekombináz, amely a FIS és IHF fehérjék segítségével katalizálja az att hibrid helyek rekombinációját
|
Helyspecifikus tyrosin rekombináz, amely kétirányú rekombinációt végez a loxP helyekhez való kötés után
|
Serin rekombináz, amely irreverzibilis és egyirányú rekombinációt végző két identikus MRS hely között
|
Serin rekombináz, amely egyirányú rekombinációt vezet be az attP/attB kötési helyek között, míg az I-SceI endonukleáz megsemmisíti a termékkel kapcsolatos szennyező anyagokat és a nem rekombinált szülő plazmidot
|
Jellemzők
|
Függ a gazdasztényezők FIS és IHF kifejezésétől; belső toxicitás; Maradék szülő plazmid és mini-plazmid
|
Maradék szülő plazmid és mini-plazmid
|
Magas szelet; Maradék szülő plazmid és mini-plazmid
|
A szülő plazmid degradációja járul hozzá a csökkent szelethez
|
Yaohai Bio-Pharma Kínál Egy Állomásos CDMO Megoldást Minikör DNA-ra
Hivatkozás:
[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minicircle DNA: A jövő a DNA-alapú vektorok számára? Trends Biotechnol. 2020 okt.;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.