Fő enzymek hosszú RNA gyártásához
az mRNA, mint típusú hosszú kódoló RNA, biztonságosan és hatékonyan teljesített egy szélesebb emberi csoportban a COVID-19 idején. Más hosszú kódoló RNA-k, például az önfejtő RNA (saRNA) és a körös mRNA (circRNA) szintén mutattak hatékonyságot a preklinikai és klinikai tanulmányok során.
A hosszú kódoló RNA nagy mérlegű gyártása in vitro transkripcióra (IVT) támaszkodik több enzimatikus reakció segítségével. Az RNA gyártás lépéseit tartalmazzák: sablon DNA előkészítése, IVT RNA szintézis, cirkuláció, DNA eltávolítása, RNA módosítás (fedés és farok), valamint RNA tisztítása.
Több kulcsfontosságú enzimet használnak a hosszú kódoló RNA gyártásában (pl. mRNA, saRNA és circRNA), beleértve a korlátozó endonukleázát, a T7 RNA polymerázist (T7 RNAP), az RNáz inhibitorát, az inorganikus pirifoszfátázát, a DNáz I-t, a vaccinia fedő enzimet és az RNáz R-t.
|
A folyamat
|
Enzim
|
Függvény
|
|
Sablon DNA előkészítése
|
Korlátot tűznek a restrikció-endonukleázok
|
A plazmid DNS (pDNS) lineárisítása a hosszabb transkript generálásának elkerülése érdekében.
|
|
IVT RNA szintézis
|
T7 RNA polymeráz (T7 RNAP)
|
Kötődnek a T7 promotorhoz és specifikus RNA-transkriptot alkotnak; Játsszanak kulcsfontosságú szerepet az IVT reakció során.
|
|
RNáz inhibitor, rekombinált
|
Inhibálnak az RNáz tevékenységét az IVT-reakció során.
|
|
Pirofoszfatasz, inorganikus (iPPase)
|
Előzék meg a pirofoszfát képzését az IVT-reakció során.
|
|
DNS eltávolítása
|
DNáz I
|
Eltávolítsa a DNA-sablonot.
|
|
RNA módosítás
|
Vaccínia fedélzeti enzim
|
Adjuk hozzá a Cap1 szerkezeteket az IVT mRNA 5′-végéhez.
|
|
2’-O-Metyltransferáz
|
|
circRNA bővítés
|
Rnáz R
|
Lineáris RNA megsemmisítése és körkörű RNA gazdagítása.
|
A Yaohai Bio-Pharma egyetlen ablakból kínál CDMO megoldást enzimek számára
HU
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
