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ADN minicírculo

ADN minicírculo

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Modalidad

ADN minicírculo

El ADN minicírculo (mcDNA) es un vector de ADN no viral más pequeño derivado de una estructura similar al ADN plasmídico parental. El ADN minicírculo se diferencia del ADN plasmídico convencional en que contiene promotor y gen de interés (GOI), sin origen de replicación (ORI) ni marcador de selección (selMark). El ADN minicírculo se produce en bacterias mediante recombinación in vivo para eliminar secuencias adicionales (llamadas miniplásmido) del ADN plasmídico. Debido a su seguridad, el ADN en minicírculo ha ganado popularidad como vector no viral para terapia génica, vacunas de ADN, etc.

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Figura 1. Estructura del ADN plasmídico (pDNA) y del ADN minicírculo (mcDNA)

Sistemas de recombinación de ADN en minicírculo

Se han estudiado cuatro sistemas principales de recombinación de ADN en minicírculo in vivo, incluida la integrasa del fago λ, la recombinasa Cre del fago P1, la resolvasa ParA y la integrasa PhiC31 se/I-SceI.

Estrategia

Integrasa del fago λ

Recombinasa del fago P1 Cre

resolvasa ParA

PhiC31 integra se/I-SceI

Mecanismo

Tirosina recombinasa, que funciona a través de las proteínas FIS e IHF para catalizar la recombinación de sitios híbridos att.

Tirosina recombinasa de sitio específico, que realiza una recombinación bidireccional cuando se une a sitios loxP

Serina recombinasa, que realiza una recombinación irreversible y unidireccional entre dos sitios MRS idénticos

La serina recombinasa, que media la recombinación unidireccional entre los sitios de unión attP/attB, mientras que la endonucleasa I-SceI escinde las impurezas relacionadas con el producto y el plásmido parental no recombinado.

Caracteristicas

Depende de la expresión de los factores del huésped FIS e IHF; toxicidad intrínseca; Plásmido parental residual y miniplásmido.

Plásmido y miniplásmido parental residual.

Alto rendimiento; Plásmido y miniplásmido parental residual.

Degradación del plásmido parental asociado a un rendimiento reducido.

Yaohai Bio-Pharma ofrece una solución CDMO integral para ADN en minicírculo
Referencia:

[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. ADN en minicírculo: ¿el futuro de los vectores basados ​​en ADN? Tendencias Biotecnología. 2020 octubre;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.

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