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desarrollo de Plásmido de mRNA

desarrollo de Plásmido de mRNA

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desarrollo de Plásmido de mRNA

ADN plasmídico, como in vitro transcripción (IVT) plantilla, es un material crudo importante para la fabricación de ARNm. Un alto rendimiento, alta pureza y alta recuperación del ADN plasmídico son los principales objetivo durante el desarrollo del proceso plasmídico.

Yaohai Bio-Pharma ofrece una solución integral para el desarrollo de plásmidos, incluyendo procesos aguas arriba (fermentación), procesos aguas abajo (purificación) desarrollo, caracterización del proceso y validación del proceso. Contamos con amplia experiencia en mejorar el rendimiento del plásmido y aislarlo de matrices complejas mediante el desarrollo y optimización de procesos de fermentación, purificación y eliminación de impurezas.

Detalles del Servicio

El proceso biológico básico para la fabricación de plásmidos incluye: Escherichia coli (E. coli) fermentación, recolección celular y lisado alcalino, clarificación, concentración, proceso cromatográfico de tres pasos (captura, purificación intermedia y pulido), y concentración.

Detalles del Servicio Operaciones Unitarias Parámetros
E. coli fermentación
Frasco de Agitación Composiciones de medios, antibiótico, volumen de inóculo, temperatura de crecimiento y etc.

Fermentador (7 L)

Antibiótico, volumen de inóculo, temperatura de crecimiento, pH, oxígeno disuelto (OD), modo de alimentación (p. ej., batch con alimentación), medios de alimentación, tiempo de fermentación y etc.

Cosecha de Células Microfiltración Estándar E. coli proceso de cosecha
Lisis Celular Re suspensión celular, lisis alcalina, neutralización Proporción de álcali, tiempo de lisis
Clarificación Filtración Filtración cruda, 20 µm y un filtro de 5 µm (preferido)
Concentración Ultrafiltración, filtración de flujo tangencial Tamaño de poro (o NMWC), presión transmembrana (TMP), Flujo, relación volumen de filtrado a área de membrana
Cromatografía en tres pasos Cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) o cromatografía de filtración gel (GFC) Longitud y diámetro de la columna, composición del buffer, volumen de inyección, composición de la fase móvil (adsorción y desorción), pH, velocidad de flujo, condiciones de equilibrio, unión, lavado y elución.
Cromatografía de afinidad (AF)
Cromatografía de intercambio aniónico (AEX)
Concentración Ultrafiltración, filtración de flujo tangencial Tamaño de poro (o NMWC), presión transmembrana (TMP), Flujo, relación volumen de filtrado a área de membrana
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