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Preparación de proteínas sin etiquetas

Preparación de proteínas sin etiquetas

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Preparación de proteínas sin etiquetas

Las etiquetas de proteínas, como socios de fusión utilizados en tecnologías de ADN recombinante, permiten una purificación por afinidad eficaz en un solo paso para diversas proteínas/péptidos con diferentes características. A pesar de esta importante ventaja, las etiquetas como aminoácidos exógenos pueden alterar la estructura de la proteína y las funciones biológicas. Por lo tanto, las proteínas o péptidos no etiquetados (sin etiquetas) son más preferidos para garantizar la seguridad y eficacia, especialmente en el campo biofarmacéutico. Una proteína recombinante con una etiqueta de fusión tiene posibilidades limitadas de obtener autorización de las agencias de administración médica/de medicamentos.

Basada en la plataforma de investigación y desarrollo de productos biológicos microbianos, Yaohai Bio-Pharma ofrece servicios personalizados de preparación de proteínas sin etiquetas dedicados a cumplir objetivos únicos de investigación, desarrollo y fabricación para uso clínico.

Palabras clave: producción de proteínas sin etiquetas, purificación de proteínas sin etiquetas, preparación de proteínas basadas en etiquetas libres, expresión y purificación de proteínas sin etiquetas, proteína objetivo altamente libre de etiquetas 

Aplicación: investigación en medicina humana, desarrollo de medicina animal, desarrollo de vacunas recombinantes, producción de productos biológicos de moléculas grandes recombinantes

Nuestra plataforma de I+D microbiana

Tenemos experiencia en ingeniería de cepas microbianas, fermentación y purificación de productos.

Bacterias: Escherichia coli (E. coli)

Levadura: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Opciones personalizadas
Modalidad Proteína Recombinante
Materiales para empezar Secuencias genéticas, plásmidos recombinantes o cepas modificadas genéticamente
Lo que recibe el cliente Purificar: >80%, >85%, >90% Cantidad: 0.2~10 g (a determinar por el proyecto)
Sistema de expresión y formación.

E. coli secreción periplásmica, expresión de cuerpos solubles y de inclusión;

Expresión intracelular o de secreción de levadura.

Métodos de análisis Ultravioleta (UV), ensayo de ácido bicinconínico (BCA), Bradford o Lowry para cantidad
Electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE) para pruebas de purificación
Opcional: Western blot (WB), ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA), cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)
Impurezas residuales Endotoxina (opcional)
Detalle de Servicios

Servicios

Detalle de Servicios

Cronograma mínimo (día laborable)

Síntesis de genes

Optimización de codones para un huésped de expresión específico.

7 ~ 10 días

Síntesis de genes

Construcción de plásmido/vector

Clonación en plásmido/vector

2 días

Transformación de plásmidos

Verificación de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), digestión con enzimas de restricción, secuenciación de genes

3 días

Expresión de proteínas en E. coli

Transformación de plásmidos,

2 días

Cultivo en matraz agitado

3 días

Fermentación en sacos de 7 litros, optimización.

4 días/lote

Purificación y optimización de proteínas sin etiquetas

5~10 días/lote

Pruebas mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE)

Expresión de proteínas en levadura.

Preparación de células competentes de levadura.

4 días

Linealización y electrotransformación de plásmidos.

Fermentación en sacos de 7 litros, optimización.

5 días

Purificación y optimización de proteínas sin etiquetas

7 días/lote

Purificación de proteínas sin etiquetas

5~10 días/lote

Control de calidad por SDS-PAGE

Servicios Adicionales (Opcional)
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