Yaohai Bio-Pharma ofrece servicios de prueba de secuencia N-terminal y análisis de datos basados en Cromatografía Líquida-Espectrometría de Masas (LC-MS) o el método de degradación de Edman, lo que le permite determinar los aminoácidos en los respectivos extremos del proteína de interés. La modificación N-terminal también puede ser analizada por LC-MS.
Hemos estado involucrados en la Caracterización Estructural de Proteínas de varias grandes moléculas, incluidas Vacunas Recombinantes de Subunidades, Nanocuerpos/VHHs/ Antibodies de Dominio Único (sdAbs), Fragmentos de Antibody, Hormonas/Péptidos, Citocinas, Factores de Crecimiento (GF), Enzimas, Colágenos, etc.
Requisitos Regulatorios para la Secuenciación N Terminal
De acuerdo con las directrices ICH Q6B, es necesario confirmar la secuencia de su proteína y examinar los extremos por cualquier variación que pueda existir.
Métodos de Secuenciación N Terminal
Análisis |
Método |
Secuenciación del Extremo N-terminal |
Degradación de Edman, Cromatografía Líquida-Espectrometría de Masas (LC-MS) |
Procedimientos
LC-MS
1. Marcado fluorescente del extremo N-terminal de la proteína
2. Digestiones múltiples
3. Análisis por cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas (LC-MS/MS)
Degradación de Edman
1. Electroforesis en gel de sulfato de sodio dodecil (SDS) de su proteína objetivo
2. Transferencia del gel a membranas de fluoruro de polivinilideno (PVDF) y tinción
3. Identificar y cortar la banda de la proteína objetivo
4. Secuenciación de Edman del extremo N-terminal
5. Análisis de datos