Yaohai Bio-Pharma ofrece pruebas de secuencia N-terminal y servicios de análisis de datos basados en cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS) o el método de degradación de Edman, que le permite determinar los aminoácidos en los respectivos extremos de la proteína de interés. La modificación N-terminal también se puede analizar mediante LC-MS.
Hemos estado involucrados en la caracterización estructural de proteínas de varias moléculas grandes, incluidas vacunas de subunidades recombinantes, nanocuerpos/VHH/anticuerpos de dominio único (sdAb), fragmentos de anticuerpos, hormonas/péptidos, citocinas, factores de crecimiento (GF), enzimas, colágenos. etc.
Requisitos reglamentarios para la secuenciación del terminal N
De acuerdo con las pautas ICH Q6B, es necesario confirmar la secuencia de su proteína y examinar los extremos para detectar cualquier variación que pueda existir.
Métodos de secuenciación de terminales N
| Analisis |
Método |
| secuenciación N-terminal |
Degradación de Edman, cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS) |
Procedimientos
LC-MS
1. Marcado fluorescente N-terminal de proteína
2. Digestiones múltiples
3. Análisis LC-MS/espectrometría de masas (MS)
degradación de edman
1. Electroforesis en gel de dodecilsulfato de sodio (SDS) de la proteína objetivo
2. Transfiera el gel a membranas de fluoruro de polivinilideno (PVDF) y coloración.
3. Identificar y cortar la banda de proteína objetivo.
4. Secuenciación de Edman del extremo N
5. Análisis de los datos
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