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Síntesis de circRNA personalizada

Síntesis de circRNA personalizada

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ARN IVT

Síntesis de circRNA personalizada

El ARNm circular (circRNA) se ha utilizado ampliamente en el estudio de las funciones de genes o proteínas. Mientras tanto, es popular en el desarrollo de productos biológicos profilácticos y terapéuticos, similares al ARNm.

Yaohai Bio-Pharma ha establecido un conjunto de tecnologías de síntesis de circRNA para proporcionar ARN de alta calidad, como diseño y optimización de secuencias, transcripción in vitro (IVT), circularización/ciclación, purificación y encapsulación de nanopartículas lipídicas (LNP). Todos los productos se lanzan bajo estrictos estándares de control de calidad (QC).

Aplicaciones de ARN circular

En comparación con el ARNm lineal, el ARN circular (ARNcirc) tiene una estructura más estable y es un punto importante en la investigación actual de fármacos de ácido nucleico. Tiene una amplia gama de aplicaciones en diferentes campos, ya sea como circRNA codificante o no codificante, incluidas vacunas profilácticas para enfermedades infecciosas, vacunas oncológicas terapéuticas, fármacos oncológicos terapéuticos, terapia de reemplazo de proteínas, medicina regenerativa, terapia celular y génica (CGT). , papel de esponja molecular y aptámero de ARN.

Detalle de Servicios
Proceso Servicio opcional Detalle de Servicios Plazo de entrega (día)
Diseño y optimización de secuencias de circRNA Diseño y optimización de secuencias de codificación. Optimización de codones CDS 1
Diseño y optimización de secuencias no codificantes. Secuencia de intrones y exones, diseño y optimización de brazos homólogos y espaciadores 1 - 2
Preparación de plásmido circular Síntesis de genes Síntesis de genes (de terceros) 7 - 10
Amplificación de plásmidos Amplificación de plásmidos 2
Extracción de plásmido
Preparación de plásmido linealizado Linealización y purificación de plásmidos. Linealización de plásmidos 1
Purificación del ADN por linealización
Transcripción y ciclación in vitro Transcripción y ciclación in vitro Reacciones de transcripción y ciclación in vitro. 1 - 2
Digestión de RNasa R
Optimización opcional Composición de reacción, optimización del tiempo. 2 - 5
Purificación de ARN circular Método de purificación convencional Precipitación de cloruro de litio 1
Purificación de perlas magnéticas 1
Purificación de circRNA altamente pura Cromatografía líquida preparativa de alta resolución (HPLC) 1 - 2
Intercambio de búfer La ultrafiltración 1
Liofilización de ARN circular Llenado de muestra Relleno 2 - 3
liofilización Precongelación
Secado Primario (Sublimación)
Secado Secundario (Desorción)
Encapsulación de circRNA-LNP Encapsulación LNP Pretratamiento de materiales y líquidos 2
Mezcla de dispositivos microfluídicos
Intercambio de búfer Filtración de flujo tangencial 1
Esterilizar Filtración
Control de calidad del ADN plásmido Concentración/pureza Espectrofotometría ultravioleta (UV) 1 - 2
Conformación del plásmido Electroforesis en gel de agarosa (AGE)
Electroforesis capilar (CE): opcional
Identificar plásmido Identificación de enzimas de restricción/EDAD
Control de calidad de circRNA Concentración/pureza Espectrofotometría ultravioleta (UV) -
Pureza Electroforesis en gel de agarosa (AGE)/E-Gel 0.5
HPLC opcional 1
Control de calidad de circRNA-LNP Eficiencia de encapsulación Método RiboGreen 1
Tamaño de partícula Dispersión de luz dinámica (DLS) 1
Índice de polidispersidad Dispersión de luz dinámica (DLS) 1
Potencial zeta Dispersión de luz dinámica (DLS) 1
Ensayo de potencia basado en células Transfección celular Recubrimiento celular, transfección celular. 4
Detección de proteínas objetivo Observación de fluorescencia, Western Blot/ELISA 1 - 3
Casos de éxito

Transfectamos ARNcirc de proteína fluorescente verde mejorado (ARNcirc de eGFP), ARNcirc de mCherry, ARNcirc de luciferasa en células 293T y detectamos la proteína objetivo a través de fluorescencia, señal luminiscente o de color, Western blot (WB) y ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA).

Ensayos de potencia basados ​​en células de muestras de ARN circular de Yaohai Bio-Pharma

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