Los productos obtenidos por ciclización in vitro y enriquecimiento con RNasa R requieren una eliminación adicional del ARN sintetizado in vitro (IVT), incluidos los sustratos no consumidos en la reacción de ciclización, productos secundarios de la reacción y ARN fragmentado.
Yaohai Bio-Pharma cuenta con soluciones de purificación diversificadas y maduras como el método de precipitación con LiCl, purificación con beads magnéticos y métodos propios de purificación para eliminar eficazmente varios tipos de impurezas y preparar circRNA de alta pureza.
Solución de purificación para pequeñas cantidades de circRNA para transfección celular y como parte de experimentos en animales.
Solución de purificación para pequeñas cantidades de circRNA para transfección celular y como parte de experimentos en animales.
Escenarios de aplicación con mayor calidad;
Proceso de purificación estable y escalable que cumple con los requisitos de producción GMP.
Proceso | Servicio opcional | Detalles del Servicio | Plazo de Entrega (Día) | Entregables |
purificación de circRNA | Solución de purificación convencional | Precipitación con cloruro de litio | 1 | sustancia circRNA |
Purificación con beads magnéticos | ||||
Purificación Altamente Purificada de circRNA | Cromatografía líquida de alta rendimiento preparativa (HPLC) | 1-2 | ||
Intercambio de buffer | Ultrafiltración | 1 | ||
control de calidad circRNA | Concentración/purificación | Espectrofotometría Ultravioleta (UV) | 0.5 | Informe de prueba |
Pureza | Electroforesis en Gel de Agarosa (AGE)/E-Gel | |||
HPLC-opcional | 1 |
Se pueden lograr escenarios de aplicación.
circRNA con una pureza superior al 90%;
Mediante un control estricto de las RNasas en el entorno experimental y los consumibles, se previene eficazmente la degradación del ARN.
Yaohai Bio-Pharma ha establecido una solución madura de purificación de circRNA que puede eliminar eficazmente varios impurezas relacionadas con el proceso.
Los productos de ARN circular purificados por la solución convencional aún están mezclados obviamente con ARN fragmentado e intrones.
Después de la solución de purificación desarrollada por Yaohai Bio-Pharma, varias impurezas de ARN lineal, como ARN fragmentado e intrones, pueden eliminarse con éxito.
validación de la Expresión de circRNA
Usando un liposoma convencional, el circRNA de eGFP purificado se transfiere a las células 293T, y se observa una señal de fluorescencia después de 24 h y continúa aumentando a las 48 h. La señal de fluorescencia todavía se puede detectar el séptimo día y el decimocuarto día después de la transfección.