el mRNA se ha utilizado ampliamente en el estudio de funciones génicas o proteicas. Además, es común en el desarrollo de biológicos preventivos y terapéuticos. Como una estrategia común de síntesis de moléculas de ARN, la transcripción in vitro (TIV) nos permite obtener transcritos personalizados de manera eficiente.
Yaohai Bio-Pharma ha desarrollado un conjunto de tecnologías de síntesis de mRNA para proporcionar ARN de alta calidad, como el diseño y optimización de secuencias, TIV, purificación, liofilización y encapsulación en nanopartículas lipídicas (NLP). Todos los productos se liberan bajo estrictos estándares de control de calidad (CC).
Con el estallido de la pandemia de COVID-19 en 2020, la tecnología de mRNA ha avanzado a pasos agigantados, y su investigación y aplicaciones relacionadas han obtenido un desarrollo sin precedentes, incluidas las vacunas preventivas para la prevención de enfermedades infecciosas, vacunas oncológicas terapéuticas y medicamentos, terapia tumoral, terapia de reemplazo de proteínas, medicina regenerativa y terapia celular y génica (CGT).
vacuna de mRNA | terapéuticos de mRNA |
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Proceso | Servicio opcional | Detalles del Servicio | Período de Entrega (día laborable) | Entregable |
diseño y Optimización de Secuencia de mRNA | Diseño y optimización de secuencias codificantes | Diseño de secuencia CDS y optimización de codones | 1 a 3 | Archivo de secuencia |
Diseño y optimización de secuencias no codificantes | Diseño y optimización de secuencias UTR, poliA | |||
Preparación del plásmido de plantilla de transcripción | Preparación de plásmidos recombinantes | Síntesis de genes | 7 a 10 | |
Amplificación y extracción de plásmidos | 4 | |||
Linealización y purificación de plásmidos | ||||
transcripción in vitro de mRNA | Tapado co-transcripcional (método en un solo paso) | Transcripción in vitro (IVT) / Análogo de cap | 1-2 | N/A |
Modificaciones de nucleótidos (modificaciones de UTP/CTP) | ||||
Eliminación de la plantilla de ADN (DNasa I) | ||||
Tapado enzimático (proceso en dos pasos) | IVT | 2-3 | ||
Modificaciones de nucleótidos (modificaciones de UTP/CTP) | ||||
Eliminación de la plantilla de ADN (DNasa I) | ||||
purificación de mRNA (precipitación con cloruro de litio/beads magnéticos) | ||||
Tapado enzimático | ||||
purificación de ARNm | Esquema de purificación convencional | Precipitación con cloruro de litio | 1 | sustancia medicamento de mRNA |
Purificación con beads magnéticos | ||||
Esquema de purificación con columna cromatográfica | Combinación de múltiples métodos de cromatografía | 1-2 | ||
Intercambio de buffer | Ultrafiltración | 1 | ||
liofilización de ARNm | Liofilización | Precongelación | 2-3 | polvo liofilizado de mRNA |
Secado primario (sublimación) | ||||
Secado secundario (desorción) | ||||
encapsulación de mRNA | Encapsulamiento en LNP | Encapsulamiento en LNP | 2-3 | producto farmacéutico de mRNA-LNP |
Concentración e intercambio de buffer | ||||
análisis de calidad de mRNA | sustancia de medicamento de mRNA / polvo liofilizado | Concentración, pureza | 1 | Informe de prueba |
Integridad, eficiencia de capping, distribución del colita polyA | 2-5 | |||
producto de medicamento de mRNA-LNP | Eficiencia de encapsulación | 1 | ||
Tamaño y distribución de partículas | ||||
Carga superficial | ||||
validación de expresión de mRNA | evaluación de células 293T | Platón de células | 4 | |
Transfección transitoria de células | ||||
Observación de la señal de fluorescencia | 1 a 3 | |||
Western blot (WB) / Ensayo inmunoenzimático ligado (ELISA) |
5' Cap |
▪ Sin cap ▪ Cap0, co-cappado ▪ Cap1, co-cappado ▪ Cap1, cappado enzimáticamente |
5' UTR/3' UTR |
▪ Secuencia UTR natural ▪ Secuencia UTR mutante/ingenierizada |
cola poliA 3' |
▪ Cola de 100A ~120A (recomendada) ▪ Cola poliA segmentada ▪ Otras colas personalizadas |
Nucleósidos modificados |
▪ Bases no modificadas ▪ Pseudouridina (Ψ) ▪ N1-Metilpseudouridina (N1Ψ) ▪ 5-metilcitosina (m5C) ▪ 5-metiluridina (m5U) ▪ 5-metoxiuridina (5moU) ▪ 2-tiouridina (s2U) ▪ 2′-O-metil-U ▪ Otras modificaciones |
Flujo de Servicio Integrado
Proporcionar una serie de servicios desde el diseño de secuencia en la etapa inicial hasta la preparación de mRNA, control de calidad y validación de expresión en la etapa posterior.
Diseño y Optimización de Secuencia a la Vanguardia a Nivel Internacional
El diseño y la optimización profesionales de secuencias de mRNA facilitan una expresión eficiente del mRNA.
Modificaciones Nucleósídicas Diversificadas
Aumentan efectivamente la expresión de mRNA y reducen las respuestas inmunes adversas al mRNA.
Plataforma de Purificación Madura
Al combinar un método de purificación convencional con uno diseñado por nosotros, se obtienen muestras de mRNA de alta pureza.
Plataforma de Control de Calidad Completa
Enriquecen las opciones de control de calidad para cumplir con los requisitos de pruebas rutinarias, como concentración, pureza A260/280 e integridad, así como con los requisitos de alto control de calidad, como la eficiencia de capping/distribución de poliA.
Entrega rápida
El mRNA personalizado puede ser entregado en tan solo 7 días, excepto en el caso de la síntesis de secuencia externalizada.