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diseño de secuencia de ARNm

diseño de secuencia de ARNm

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ARNt IV

diseño de secuencia de ARNm

De acuerdo con el dogma central, el ARN mensajero (mRNA) es el puente para la transmisión del material genético desde el ADN hasta las proteínas.

el ARN mensajero desempeña un papel biológico codificando proteínas in vivo, y el mRNA maduro en organismos eucariotas consta de cinco componentes: 5' Cap (estructura de cap), 5' UTR (región no codificante), el ORF (marco de lectura abierto), 3' UTR y cola de poliA en 3' (cola de poliadenilato).

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Detalles de los Servicios
Proceso Servicio opcional Detalles del Servicio Plazo de Entrega (Día)
diseño y Optimización de Secuencia de mRNA Diseño y optimización de secuencias codificantes

Alineamiento de secuencias CDS

Optimización de codones CDS

1
Diseño y optimización de secuencias no codificantes

diseño y optimización de la secuencia del 5' UTR

diseño y optimización de la secuencia del 3' UTR

diseño y optimización de la secuencia polyA

1-2
Opciones personalizables
5' UTR/3' UTR
  • Secuencia UTR natural
  • Secuencia UTR mutante/ingenierizada
cola poliA 3'
  • cola de 100A ~120A (recomendada)
  • Cola poliA segmentada
  • Otra cola personalizada
Estrategias Comunes para el Diseño de Secuencia de mRNA
componentes de mRNA Funciones Biológicas Estrategias de optimización
5' Cap Proteger al mRNA de la degradación por exonucleasas y actuar en concierto con la cola poliA en el extremo 3', proteína de unión a poliA y factor de iniciación de traducción para iniciar la traducción de proteínas. La estructura natural Cap1 evita los receptores de reconocimiento de patrones y, por lo tanto, reduce la respuesta inmunitaria natural, lo que se puede lograr mediante el tapado co-transcripcional en un solo paso o el tapado enzimático en dos pasos [ver tapado enzimático de mRNA y tapado co-transcripcional para más detalles].
5' UTR El 5' UTR puede ser reconocido por ribosomas, regular la traducción del mRNA y afectar la estabilidad del mRNA. Contienen secuencias Kozak sin una estructura secundaria muy estable. Los UTRs naturales de genes altamente expresados son preferidos para la transcripción in vitro (IVT) de mRNAs, como α-globina y β-globina.
CDS Regiones codificadoras de proteínas y secuencias codificantes para antígenos, anticuerpos u otras proteínas funcionales. La optimización de codones aumenta el nivel de traducción, teniendo en cuenta que ciertos codones no óptimos pueden desempeñar un papel en el plegamiento de las proteínas.
3' UTR Regulan la traducción del mRNA y su estabilidad. Se prefieren los UTR naturales de genes altamente expresados para mRNAs de IVT, como alfa-globina y beta-globina.
3' cola poliA Regulan la expresión de proteínas y protegen la estructura del cap contra la degradación. Se requiere una longitud adecuada (100-150 pb); codificar la cola poliA en el plásmido de plantilla de transcripción asegura una longitud más definida de la cola poliA.
Nuestras características
  • Selección diversificada de la fuente de UTR

Múltiples fuentes de bibliotecas UTR naturales y modificadas altamente expresadas; estrategia de modificación UTR madura;

  • Equipo de optimización de CDS de vanguardia

Colabora con un equipo de algoritmos de IA profesional para completar la optimización de codones.

  • Distribución uniforme de colas polyA

Añadir secuencias polyA según plantillas de ADN para controlar con mayor precisión la longitud del ARNm.

  • Combinaciones de optimización diversificadas

Lograr una expresión eficiente de ARNm con baja inmunogenicidad.

Estudio de Caso

Diseño de secuencia de un ARNm de doble reportero: ARNm mCereza-eGFP

El servicio de ARNm de Yaohai Bio-Pharma sigue mejorando con el diseño y optimización de una secuencia en tandem de doble gen reportador, lo que logra la co-expresión de dos genes.

Usando un reagente de transfección convencional, se transfiere el ARNm mCereza-eGFP de secuencia en tandem de doble gen a las células 293T, y después de 48 horas se detectan dos señales fluorescentes de mCereza (rojo) y proteína fluorescente verde mejorada (eGFP) con expresión simultánea, y el gráfico apilado se resalta en amarillo.

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Expresión de mRNA de mCherry-eGFP en la célula 293T

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