Analisis |
Métodos |
Peso molecular |
Cromatografía líquida-Espectrometría de masas (LC-MS) / Cromatografía líquida/Espectrometría de masas por electropulverización (LC/ES-MS) de proteínas intactas, reducidas y N-desglicosiladas |
Análisis de variantes de tamaño |
LC-MS, cromatografía de exclusión por tamaño-espectrometría de masas (SEC-MS), dispersión dinámica de luz (DLS), ultracentrifugación analítica (AUC), cromatografía de exclusión por tamaño-dispersión de luz multiángulo (SEC-MALS) |
Análisis de variantes de carga |
LC-MS, cromatografía de intercambio iónico-espectrometría de masas (IEX-MS) |
Estabilidad térmica (Tm) |
Calorímetro diferencial de barrido (DSC) |
Coeficiente de extinción |
Analizadores de aminoácidos |
Mapeo de péptidos |
LC-MS después de la digestión con proteasas |
Cobertura de secuencia de proteínas |
LC-MS después de una digestión uno-tres |
Secuenciación N-terminal |
LC-MS después de la digestión, determinada por mapeo de péptidos Degradación de Edman |
Secuenciación C-terminal |
LC-MS después de la digestión |
Enlaces disulfuro |
LC-MS después de la digestión |
Grupos sulfhidrilo libres |
ensayo de ellman |
Oxidación de aminoácidos |
LC-MS, cromatografía líquida de alta resolución en fase inversa (RP-HPLC) o cromatografía de interacción hidrofóbica-cromatografía líquida de alta resolución (HIC-HPLC) y espectrometría de masas (MS) |
Isomerización de aminoácidos |
LC-MS después de la escisión enzimática |
desamidación |
LC-MS después de la escisión enzimática |
Modificación N-terminal |
LC-MS después de la digestión |
Modificación del terminal C |
LC-MS después de la digestión |
Recorte de lisina C-terminal |
LC-MS después de la digestión |
Perfil de N-glicano |
LC-MS de glicanos liberados |
Sitio de N-glicosilación |
LC-MS después de la escisión enzimática |
Ocupación del sitio de N-glicosilación |
LC-MS después de la digestión con desglicosilasa y proteasa (tripsina o Asp-N) |
Estructura de orden superior |
Dicroísmo circular (CD)Espectrómetro de infrarrojos (IR) |