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Sitio de N-glicosilación

Sitio de N-glicosilación

El análisis del sitio de N-glicosilación es crucial para comprender las funciones de los glicanos. Yaohai Bio-Pharma utiliza Cromatografía Líquida-Espectrometría de Masas (LC-MS) después del corte enzimático para el sitio de N-glicosilación.

Hemos estado involucrados en la Caracterización Estructural de Proteínas de varias grandes moléculas, incluidas Vacunas Recombinantes de Subunidades, Nanocuerpos/VHHs/ Antibodies de Dominio Único (sdAbs), Fragmentos de Antibody, Hormonas/Péptidos, Citocinas, Factores de Crecimiento (GF), Enzimas, Colágenos, etc.

Requisitos Regulatorios para el Sitio de N-Glicosilación

De acuerdo con la guía ICH Q6B, “para las glicoproteínas, se determina el contenido de carbohidratos (azúcares neutros, azúcares aminados y ácidos siálicos). Además, se analiza la estructura de las cadenas de carbohidratos, el patrón de oligosacáridos (perfil antenar), y los sitios de glicosilación de la cadena polipeptídica en la mayor medida posible.”

Método Analítico
Análisis Métodos
Sitio de N-glicosilación Cromatografía Líquida-Espectrometría de Masas (LC-MS) después del cleavage enzimático
Procedimientos

1. Digestión enzimática de la proteína utilizando tripsina u otra proteasa

2. Separar los glicopéptidos fragmentados

3. Confirmar el sitio de N-glicosilación por LC-MS

4. Analizar datos

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