El análisis del sitio de N-glicosilación es crucial para comprender las funciones de los glicanos. Yaohai Bio-Pharma utiliza cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS) después de la escisión enzimática para el sitio de N-glicosilación.
Hemos estado involucrados en la caracterización estructural de proteínas de varias moléculas grandes, incluidas vacunas de subunidades recombinantes, nanocuerpos/VHH/anticuerpos de dominio único (sdAb), fragmentos de anticuerpos, hormonas/péptidos, citocinas, factores de crecimiento (GF), enzimas, colágenos. etc.
Requisitos reglamentarios para el sitio de N-glicosilación
Según la directriz ICH Q6B, “para las glicoproteínas, se determina el contenido de carbohidratos (azúcares neutros, aminoazúcares y ácidos siálicos). Además, se analizan en la mejor medida posible la estructura de las cadenas de carbohidratos, el patrón de oligosacáridos (perfil de antena) y el(los) sitio(s) de glicosilación de la cadena polipeptídica.
Método analítico
| Analisis |
Métodos |
| Sitio de N-glicosilación |
Cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS) después de la escisión enzimática |
Procedimientos
1. Digestión enzimática de la proteína utilizando tripsina u otra proteasa.
2. Glicopéptidos de fragmentos separados
3. Confirmar el sitio de N-glicosilación por LC-MS
4. Analizar datos
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