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Detección de cepas

Detección de cepas

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CDMO microbiana

Detección de cepas

La importancia de la detección de cepas

La detección de huéspedes adecuados es necesaria para el desarrollo de CMC de productos biológicos, lo que determina la calidad y consistencia del producto y el proceso de fabricación. El objetivo directo de la selección del huésped es proporcionar un banco de células primarias (PCB) candidato, con altos niveles de expresión y alta estabilidad tanto en términos de estabilidad de paso como de estabilidad de almacenamiento. La selección del huésped adecuado es necesaria por dos razones principales:

 - En primer lugar, seleccionar el huésped microbiano con un alto nivel de expresión. Existen múltiples cepas disponibles comercialmente, que se utilizan para expresar diferentes tipos de proteínas, como proteínas tóxicas, proteínas solubles o proteínas eucariotas. 

 - En segundo lugar, evaluar la estabilidad genética del huésped. Las pruebas de estabilidad genética son un punto clave a lo largo del ciclo de vida de la producción. Se sugiere que la alta estabilidad genética se reconoce como otra característica clave para una cepa adecuada.

Palabras clave: selección de cepas microbianas, detección de cepas microbianas, detección de alto rendimiento de bacterias o levaduras, detección de cepas de alta producción, detección de cepas altamente estables, detección de cepas genéticamente estables Aplicación: medicina humana, medicina animal, vacunas, biología sintética, molécula grande recombinante biológicos, reactivo biológico

Servicios de detección de cepas de Yaohai Bio-Pharma

Con más de 10 años de experiencia de CDMO en productos biológicos microbianos, apoyamos el desarrollo y la fabricación de varias moléculas grandes, incluidas vacunas de subunidades recombinantes, partículas similares a virus (VLP), hormonas (insulina, GLP-1, hormona del crecimiento), citocinas ( Interleucina-2/IL-2, IL-15, IL-21), factores de crecimiento (EGF, FGF, NGF), nanocuerpos/anticuerpos de dominio único (sdAbs), enzimas, etc. 

Hemos acumulado una rica experiencia en la selección de varios tipos de vectores plásmidos y huéspedes microbianos, incluidas las bacterias. Escherichia coli (E.coli), y levadura Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Podemos encontrar el mejor sistema de expresión para sus productos biológicos únicos. 

Recopilamos varios huéspedes microbianos con fuentes claras y CoA estándar, incluidos la E.coli expresión y expresión de levaduras.

Detalle de Servicios

Servicios

Detalle de Servicios

Cronograma mínimo/día

Lo que recibe el cliente

Construcción de cepas (E. coli)

Transformación de plásmidos (multihuéspedes)

5

COA de anfitriones comerciales Informe de construcción de cepas

verificación por PCR

Purificación de cepas

Preservación de cepas

Construcción de cepas (levadura)

Preparación de células de levadura competentes.

10

Linealización de plásmidos

Electro transformación

Detección de resistencia/deficiencia nutricional

Purificación de cepas

Preservación de cepas

Selección de anfitrión adecuado

Extracción de ADN plásmido o genómico.

15 - 20

Proceso de selección del huéspedCOA de cepas diseñadas

Verificación por PCR, digestión con enzimas de restricción.

Secuenciación de genes diana

Detección de hosts de alta expresión.

Detección de huéspedes con estabilidad genética.

Preservación de cepas
Estudio de caso
Un huésped adecuado mejora el nivel de expresión de proteínas 2.5 veces.

Nos encargan desarrollar productos de alta producción. E. coli cepa. Y probamos tres tipos de comerciales. E. coli huéspedes, según las características de la proteína diana. Se muestra que las cepas S1-1 y S1-2 (Fig. A: Carril 1,2) mejoraron el nivel de proteína a 3.5 veces más que la cepa inicial del cliente (Fig. A: Carril 3). 

Además, la cepa S1-1 presentó una alta estabilidad genética (Fig. B) y fue reconocida como cepa candidata para banco primario de células (PCB).

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Nuestras características de servicio

Experiencia demostrada con varios huéspedes microbianos, por ejemplo, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink cepa 1/2/3/4; S. cerevisiae y H. polymorpha.

Tenemos experiencia con E. coli secreción periplásmica, expresión de cuerpos solubles y de inclusión, así como expresión intracelular o de secreción de levadura. No agregamos antibióticos o los agregamos bajo guía regulatoria. 

Establecemos una plataforma de detección de alto rendimiento para detectar cepas estables y de alta producción de más de cien cepas candidatas.

Se garantiza que el proceso de ingeniería y selección de cepas sea rastreable, bajo la Buena Gestión de Datos y Registros.

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