Reactivo enzimático

Modalidad

Proteasas de eliminación de etiquetas

Para mejorar la solubilidad y simplificar el proceso de purificación de proteínas recombinantes, los investigadores suelen añadir etiquetas de fusión, de las cuales se utilizan habitualmente la etiqueta His, la proteína de unión a maltosa (MBP) y la glutatión-S-transferasa (GST).

Si bien está etiquetada como una secuencia adicional de proteína, debe eliminarse para mantener la actividad biológica en la industria farmacéutica. La eliminación de etiquetas de fusión requiere proteasas específicas de sitio, como la enteroquinasa (EK), la trombina, la proteasa del virus del grabado del tabaco (TEVp), la proteasa 3C del rinovirus humano (HRV3C), la proteasa de la proteína modificadora de la ubiquitina pequeña (SUMO), el virus del moteado de las venas del tabaco ( TVMV) proteasa y carboxipeptidasa A/B (CPA/CPB).

Tipo	Enzima	Sitio de reconocimiento
Endoproteasas de eliminación de etiquetas	Enteroquinasa (EK), enteropeptidasa	DDDDK↓
	Trombina	LVPR↓GS
	proteasa TEV	ENLYFQ↓G
	proteasa HRV3C	LEVLFQ↓GP
	proteasa SUMO	Estructura terciaria SUMO
	proteasa TVMV	ETVRFQG↓S
Exoproteasas de eliminación de etiquetas.	Carboxipeptidasa A (CPA)	Aminoácidos C-terminales, excepto Pro, Lys y Arg
Exoproteasas de eliminación de etiquetas.	Carboxipeptidasa B (CPB)	C-terminal Lys y Arg

Otras proteasas

Aplicación	Enzima	Función
Otras proteasas	proteasa k	Una serina proteasa que digiere proteínas hidrolizando enlaces peptídicos.
	IdeS, proteasa IgG	Enzimas degradantes de IgG (Ides) que se escinden en un sitio específico de la inmunoglobulina G (IgG), generando fragmentos Fab y Fc.
	proteasa IgA1	Enzima proteolítica que escinde un sitio específico en la secuencia de la región bisagra de la inmunoglobulina A1 humana (IgA1).

Nucleasa

Aplicación	Enzima	Función
Nucleasa	Nucleasa	Escinde ácidos nucleicos (ADN o ARN) hidrolizando los enlaces fosfodiéster.
Nucleasa	restringir la enzima	Endonucleasa que escinde el ADN en sitios específicos o cerca de ellos.

amidasa

Aplicación	Enzima	Función
amidasa	PNGasa F	Escinde entre los residuos más internos de GlcNAc y asparagina de oligosacáridos complejos, híbridos y con alto contenido de manosa.

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