Reagente enzimático

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Proteasas de Eliminación de Etiquetas

Para mejorar la solubilidad y simplificar el proceso de purificación de proteínas recombinantes, los investigadores suelen añadir etiquetas de fusión, de las cuales His-tag, proteína de unión a la maltosa (MBP) y glutatión-S-transferasa (GST) son comúnmente utilizadas.

Aunque se añada como una secuencia extra de proteína, debe eliminarse para mantener la actividad biológica en la industria farmacéutica. La eliminación de las etiquetas de fusión requiere proteasas específicas del sitio, como enterocinasa (EK), trombina, proteasa del virus del etching del tabaco (TEVp), proteasa 3C del virus rinofárico humano (HRV3C), proteasa de la pequeña proteína modificadora de ubiquitina (SUMO), proteasa del virus del moteado venoso del tabaco (TVMV) y carboxipeptidasa A/B (CPA/CPB).

Tipo	Enzima	Sitio de Reconocimiento
Endoproteasas de eliminación de etiquetas	Enterocina (EK), enteropeptidasa	DDDDK↓
	Trombina	LVPR↓GS
	Proteasa TEV	ENLYFQ↓G
	Proteasa HRV3C	LEVLFQ↓GP
	Proteasa SUMO	Estructura terciaria de SUMO
	Proteasa TVMV	ETVRFQG↓S
Exoproteasas de eliminación de etiquetas	Carboxipeptidasa A (CPA)	Ácidos aminados terminales C, excepto Pro, Lys y Arg
Exoproteasas de eliminación de etiquetas	Carboxipeptidasa B (CPB)	Lys y Arg terminales C

Otras proteasas

Aplicación	Enzima	Función
Otras proteasas	Proteasa K	Una serina proteasa que digiere proteínas hidrolizando enlaces peptídicos.
	IdeS, proteasa IgG	Enzimas degradantes de IgG (Ides) que cortan en un sitio específico de la inmunoglobulina G (IgG), generando fragmentos Fab y Fc
	Proteasa IgA1	Una enzima proteolítica que cleava un sitio específico en la secuencia de la región de bisagra de la inmunoglobulina A1 (IgA1) humana.

Nucleasa

Aplicación	Enzima	Función
Nucleasa	Nucleasa	Corta ácidos nucleicos (ADN o ARN) hidrolizando los enlaces fosfodiéster.
Nucleasa	Restringir enzima	Una endonuclease que corta el ADN en o cerca de sitios específicos.

Amidasa

Aplicación	Enzima	Función
Amidasa	PNGase F	Cleaves entre los residuos de GlcNAc más internos y los residuos de asparagina de oligosacáridos de alta manosa, híbridos y complejos.

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