Minicircle DNA (mcDNA), ebeveyn plazmid DNA gibi bir yapıdan türetilen daha küçük bir virüs olmayan DNA vektörüdür. Minicircle DNA, geleneksel plazmid DNA'dan farklı olarak, kopyalanma kökeni (ORI) ve seçim işareti (selMark) olmadan ilgi geni (GOI) ve promotor içerir. Minicircle DNA, plazmid DNA'dan fazladan dizileri (mini-plazmid olarak adlandırılanlar) kaldırmak için vivo rekombinasyonu aracılığıyla bakterilerde üretilir. Güvenliği nedeniyle, minicircle DNA, gen terapisi ve DNA aşıları gibi alanlarda popülerlik kazanmıştır.
Şekil 1. Plazmid DNA (pDNA) ve Minicircle DNA (mcDNA) Yapısı
Minicircle DNA Rekombinasyon Sistemleri
Dört ana minicircle DNA vivo rekombinasyon sistemi incelendi: Faj λ integrase, Faj P1 Cre rekombinaze, ParA çözücü, PhiC31 integrase/I-SceI.
|
Strateji
|
Faj λ integrase
|
Faj P1 Cre rekombinaze
|
ParA çözücü
|
PhiC31 integrase/I-SceI
|
|
Mekanizma
|
FIS ve IHF proteinleri aracılığıyla işleyen tirozine rekombinaz, att hibrit sitelerinin yeniden birleşimini katalizler
|
LoxP sitelerine bağlandığında iki yönlü bir yeniden birleşme yürüten site-özel tirozine rekombinaz
|
İki aynı MRS sitesi arasında tersine çevrilemeyen ve tek yönlü bir yeniden birleştirmeyi yürüten serin rekombinaz
|
AttP/attB bağlayıcı siteleri arasındaki tek yönlü yeniden birleşimi medyasi ederken, I-SceI endonükleaz ürünle ilgili kirlilikleri ve yeniden birleşmemiş ebeveyn plazmidini keser
|
|
Özellikler
|
Ana faktörler FIS ve IHF'nin ifadesine bağlıdır; içsel toksiklik; Kalan ebeveyn plazmid ve mini-plazmid
|
Kalan ebeveyn plazmid ve mini-plazmid
|
Yüksek verim; Kalan ebeveyn plazmid ve mini-plazmid
|
Ebeveyn plazmidin bozunması ile ilişkili azalma verimi
|
Yaohai Bio-Pharma, Minicircle DNA için Tek Adımlı CDMO Çözümü Sunuyor
Kaynak:
[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minicircle DNA: DNA Tabanlı Vektörlerin Geleceği mi? Trends Biotechnol. 2020 Eki;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
