Rekombinante Ensim

Modaliteit

Rekombinante Ensimes

Rekombinante Ensim vir Terapeutiese Gebruik

Terapeutiese ensimes wat deur biotegnologiese prosesse verkry word, word wydverspreid gebruik vir verskeie kliniese toepassings, insluitend enzymvervangingsterapie, afbreek van opgespoorde metaboliete en giftige stowwe, kankerbehandeling en genomredigering. Verskeie terapeutiese ensimes kan in 'n mikrobiële uitdruksstelsel produseer word.

Toepassing	Enzymo's	Stof	Tipesie Produkte/Pipelines
Ensimvervangingsterapie	Adenosien deaminase, ADA	Adenosien of deoxyadenosien	Elapegademase-lvlr (Revcovi)
Ensimvervangingsterapie	Fenilalaan ammonia lyase, PAL	Fenilalaan	Pegvaliase-pqpz (Palynziq)
Afbraak van opgespoorde metaboliete	Uricase/Urate Oxidase	Ureumzuur	Peglticase (Krystexxa)Rasburicase (Fasturtec)
	Kollagenase	Kollageen "litteken"	Kollageenasie clostridium histolyticum (Xiaflex, Qwo, Santyl)
	Gekapte Plasmin	Kollageen, fibronektien en laminien	Ocriplasmin (Jetrea)
	Gekapte weefselplasminogeen aktivaatoor (tPA)	Plasminogeen	Reteplase (Retavase)
	IgG Protease	Immunoglobulien G (IgG)	Imlifidase (Idefrix)
	IgA Protease	Immunoglobulien A (IgA)	PKU308/AP308IGAN IgA protease
Gif afbreek	Carboxypeptidase G2	Methotrexaat	Glucarpidase (Voraxaze)
Kankerbehandeling	Asparagine-spesifieke enzym	Asparagine	Asparaginase (Elspar) Calaspargase pegol-mknl (Asparlas)
Genoombewerking	Cas9 Nuklease	Doelgen	Exagamglogene autotemcel (Exa-cel, CTX001)

Rekombinante Enzym as Materiaal

Daar is verskeie enzime wat gebruik word in lank koderende RNA-produksie (bv. mRNA, saRNA, circRNA), antiliggiet–middel konjugeerders (ADCs) produksie, en ander. Mikrobieel geproduseerde enzime is koste-effektiever as diere selles, veral die E. coli-uitdruksstelsel.

Toepassing	Enzymo's	Funksie
Enzime vir Lineêre RNA Produksie, RNase-vry	Beperkingsendonuklease	Linearisering van plasmid-DNA (pDNA) om langer transkripte te voorkom.
	T7 RNA-polimerase (T7 RNAP)	Bind aan die T7-promotor en genereer spesifieke RNA-transkripte; Speel 'n sleutelrol tydens die in vitro transkripsie (IVT)-reaksie.
	Vaccinia-kapping enzym	Voeg Kapp-strukture by die 5′-uithange van IVT mRNA.
	Pirifosfaatase, anorganiese (iPPase)	Voorkom pyrofosfaat tydens die IVT-reaksie.
	RNase-inhibitor, rekombinant	Inhibeer RNase-aktiwiteit tydens die IVT-reaksie.
	DNase I	Verwyder die DNA-sjabloon.
Ensim vir circRNA-produksie, RNase-vry	Rnase r	Verwerf lineêre RNA en verrikonstrueer sirkulêre RNA.
Ensim-gemedieerde glykan-konjugasie	Peptide-N-glikosidase (PNGase F)	Sny die amideband tussen die eerste suiker GlcNAc en die Asn297-sideketting; Vryglykane van IgG-antilewe.
	Bacteriële transglutaminase (BTG)	Koppel payload lys spesifiek om ADC's te genereer.
	Sortase A	Katalyseer die ligasie van proteïne.
	β1,4-galactosidase	Vry al terminal galaktoses en vorm 'n homogene G0 isoform van die antilawe.
	β1,4-galactosyltransferase (Gal-T)	Oorbreng 'n suikerresidu met 'n chemies reaktiewe funksionele groep.
	α2,6-sialyltransferase (Sial T)	Incorporereer terminal sialinezuur residus in die oorspronklike glykanstruktuur van 'n antilawe.
Enzym-gebaseerde glykan ombou en glykoingenieurswese	Endo-N-acetylglucosaminidase (ENGase)	Hidroliseer die β1,4-glikosidiese binding tussen GlcNAcβ1–4GlcNAc van N-glykane; Verwyder N-gekoppelde glykane in die Fc-streek van IgG-antistowwe.
	Endoglycosidase S (EndoS)
	Glykosiltransferasies (GTs)	Oorbreng N-glykan oxazoline na defukosileerde IgGs.
Ander	Enzyme wat deur mikrobiele stres geproduseer word	Aangepaste behoefte

Rekombinant Enzym as Reagensie

Etiketverwydering Proteases

Fusie-etikette word dikwels gebruik om die oplosbaarheid en stabiliteit van rekombinante proteïene van interesse te verbeter en hulle makliker te purifiseer. Die algemeen gebruikte etikette sluit in His-tag, maltoos-bindende eiwit (MBP), glutathion-S-transferase (GST), ens.

Tipeens word 'n skakelvolgorde tussen die fusie-etiket en doelwitproteïenvolgorde bygevoeg om die etiket te verwyder. Die verwaging van fusie-etikette vereis plekspesifieke proteasies, soos enterokinase (EK), trombin, tabakseffense eiwitprotease (TEVp), menslike rhinovirus protease 3C (HRV3C), klein ubiquitin-modifiserende eiwit (SUMO) protease, tabaksvaadvlekkingvirus (TVMV) protease, en carboxypeptidase A/B (CPA/CPB).

Tipe	Enzymo's	Erkenningstasie
Etiketverwyderingseindoproteasies	Enterokinase (EK), enteropeptidase	DDDDK↓
	trombin	LVPR↓GS
	TEV protease	ENLYFQ↓G
	HRV3C protease	LEVLFQ↓GP
	SUMO protease	SUMO tersiêre struktuur
	TVMV protease	ETVRFQG↓S
Etiketteringsverwydering exoproteasen	Carboxypeptidase A (CPA)	C-terminal amiinozure, behalwe Pro, Lys en Arg
Etiketteringsverwydering exoproteasen	Carboxypeptidase B (CPB)	C-terminale Lys en Arg

Ander proteasen, nuclease en amidase

Toepassing	Enzymo's	Funksie
Ander proteasen	Protease K	'n Serien protease wat proteïne verteer deur peptiidbindinge hidroliserend.
	IdeS, IgG protease	IgG-verdelende enzym (Ides) wat by 'n spesifieke plek van immunoglobuline G (IgG) afsny, Fab- en Fc-fragmente genereerend
	IgA1 protease	'n Proteolytiese enzym wat 'n spesifieke plek in die menslike immunoglobuline A1 (IgA1) scharnierstreekvolgorde afsny.
Nuclease	Nuclease	Klief nukleiesezure (DNA of RNA) deur die fosfoesterbindinge te hidroliseer.
Nuclease	Beperkingsenime	’n Endonuclease wat DNA by of naby spesifieke plekke klief.
Amidase	PNGase F	Klief tussen die innerste N-asetilglukosamine (GlcNAc) en asparagienresidus van hoë mannose, hibried, en komplekse oligosakharide.

Yaohai Bio-Pharma Bied Eenmalige CDMO Oplossing vir Rekombinante Enieme

Verwysing:

[1] Hennigan JN, Lynch MD. Die verlede, hede en toekoms van enzym-gebaseerde terapieë. Drug Discov Today. 2022 Jan;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.

Alle Kategorieë

Modaliteit