Pasgemaakte saRNA-sintese
Selfversterkende mRNA (saRNA), ook bekend as replikon-RNA, kodeer in vitro-transkripsie (IVT) mRNA-volgordes en virale replikase-gene afgelei van alfavirus of flavivirusse. Virale replikase-gene laat die self-amplifikasie van die mRNA toe, wat lei tot verhoogde proteïenuitdrukking en 'n minimum vereiste dosis RNA in vergelyking met nie-versterkende mRNA's. Nog 'n aspek is dat saRNA 'n relatief groot molekule is (meer as 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma het 'n stel mRNA-sintesetegnologieë gevestig om nie-versterkende mRNA en selfversterkende mRNA (1000 nt~14000 nt) te verskaf, soos volgordeontwerp en -optimalisering, IVT, suiwering, vriesdroging en lipied-nanopartikel (LNP) inkapseling . Alle produkte word vrygestel onder streng gehaltebeheerstandaarde.
Fig.1 Strukturele kenmerke van IVT-mRNA's: Konvensionele, sirkelvormige en selfversterkende mRNA.
Volgordekenmerke van selfversterkende mRNA
Die selfversterkende RNA bestaan uit vier nie-strukturele proteïene (aangewys as nsP1, nsP2, nsP3 en nsP4), wat afgelei is van alfavirusse, Venezolaanse perde-enkefalitisvirus (VEEV). Onder hierdie vertoon nsP1 dubbele ensiematiese aktiwiteite, naamlik GTase en N7MTase, terwyl nsP2 RTPase-aktiwiteit besit, wat deurslaggewend is om die IVT-mRNA te bedek om Cap 0-struktuur te genereer. Daarbenewens dien nsP2 as 'n protease en helikase, wat die ingewikkelde verwerking van die hele nsP-kompleks vergemaklik. Die presiese funksie van nsP3 bly ontwykend, maar dit is betrokke by interaksies met diverse gasheerselproteïene, en dra daardeur by tot die verswakking van die antivirale reaksie wat deur die gasheer gemonteer word.
'n Alfavirus subgenomiese promotor (SGP) streek is geleë voor die geen van belang (GOI). Die SGP-element fasiliteer die aanvang van GOI-transkripsie deur die lees van die volgorde wat virale nsP-proteïene kodeer, te omseil.
Fig.2 Sintese en seltoetse van eGFP saRNA van Yaohai Bio-Pharma RNASci Platform.
Pasgemaakte oplossings van saRNA
Die sinteseprotokol van saRNA is soortgelyk aan mRNA: Pasgemaakte mRNA-sintese
- Reeks ontwerp
- Plasmied Sjabloon Voorbereiding
- in vitro transkripsie (IVT)
- mRNA Ensiematiese Bedekking
- mRNA-ko-transkripsiebedekking
- mRNA-suiwering
- mRNA Lyofilisering
- LNP Encapsulation
- Analise en Toetsing
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
GEEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
