Aangepaste saRNA-sintese
Self-vermenigvuldigende mRNA (saRNA), ook bekend as replicon RNA, kodere vir in vitro transkripsie (IVT) mRNA sekwense en virusreplicase gene afgelei van alphavirus of flaviviruse. Virusreplicase gene stel die self-vermenigvuldiging van die mRNA in stand, wat lei tot verhoogde proteïenexpressie en 'n minimum vereiste dosis RNA in vergelyking met nie-vermenigvuldigende mRNAs. 'n Ander aspek is dat saRNA 'n relatief groot molekuul is (meer as 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma het 'n reeks mRNA-sintese-tegnologieë ontwikkel om nie-versterkende mRNA en self-versterkende mRNA (1000 nt~14000 nt) te verskaf, soos volgordeontwerp en -optimering, IVT, verfyning, lyofilisering en vetnanopartikel (LNP)-inkapseling. Alle produkte word onder streng kwaliteitsbeheerstandaarde vrygestel.
Figs.1 Strukturele kenmerke van IVT mRNAs: Konvensioneel, Rond en Self-versterkende mRNA.
Volgordekenmerke van Self-versterkende mRNA
Die self-versterkende RNA bestaan uit vier nie-strukturele proteïene (aangedui as nsP1, nsP2, nsP3 en nsP4), wat afgelei word van alphaviruse, spesifiek die Venezuelaanse perdes-encefalities-virus (VEEV). Onder hierdie, vertoon nsP1 twee enzymatiese aktiwiteite, naamlik GTase en N7MTase, terwyl nsP2 RTPase-aktiwiteit besit, wat essentieel is vir die bekroning van die IVT mRNA om die Cap 0-struktuur te vorm. Verder dien nsP2 as 'n protease en helikase, wat die komplekse verwerking van die hele nsP-kompleks fasiliteer. Die presiese funksie van nsP3 bly onduidelik, maar dit interakteer met verskeie gasheercel-proteïene, wat bydra tot die demping van die antivirale reaksie wat deur die gas gestig word.
'n Alphavirus subgenoomiese promotor (SGP)-streek is geleë voor die gen van belang (GOI). Die SGP-element fasiliteer die begin van GOI-transkripsie deur die lees van die volgorde wat die viruslike nsP-proteïne kodereer te omloop.
Fig.2 Sintese en seltoetse van eGFP saRNA van Yaohai Bio-Pharma RNASci Platform.
Gespesialiseerde Oplossings van saRNA
Die sintese-protokol van saRNA is soortgelyk aan mRNA: Aangepaste mRNA Sintese
- Sekwensontwerp
- Plasmidvoorbeeldvoorbereiding
- transkripsie in vitro (IVT)
- mRNA Enzimatiese Afsluiting
- mRNA Ko-transkripsie Afsluiting
- mRNA-ontsmetting
- mRNA-lyofilisering
- LNP-inkapseling
- Analise en Toetsing
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
