Die basis van inkapseling is die ontwerp en ontwikkeling van die afleweringstelsel. 'n Goed ontwerpte afleweringstelsel laat sirRNA-molekules toe om die liggaam binne te gaan sonder om deur RNA-ensieme afgebreek te word en dan effektief aan die teikenplek afgelewer te word, die selmembraan oor te steek en intrasellulêr vrygestel te word.
Lipied-nanopartikels (LNP's) is die beste afleweringstelsel beskikbaar, met voordele in inkapseling, in vivo uitdrukking en in vivo veiligheid in vergelyking met ander afleweringstelsels. LNP's met nukleïensuurfragmente word maklik in selle ingesluk en vorm intrasellulêre liggame. Sodra dit die sel binnegaan, protoneer die suur omgewing van die intrasellulêre liggaam en laai die kop van die geïoniseerde lipied positief, en versmelt dus met die binnemembraan van die intrasellulêre liggaam en stel die teikennukleïensuur in die sel vry vir aksie.
Yaohai Bio-Pharma circRNA-diens gaan voort om te verbeter en kan circRNA-LNP-inkapselingsdiens lewer om relevante kritieke prosesparameters te optimaliseer en die konsekwentheid en reproduceerbaarheid van circRNA-medikasieproduksie te verbeter.
proses | Diensbesonderhede | Afleweringstydperk (dag) | Aflewerbares |
circRNA-LNP inkapseling | Materiaal en vloeistof voorbehandeling | 2 | circRNA-LNP geneesmiddelproduk (DP) |
Mikrofluïdiese toestelvermenging | |||
Tangensiële vloeifiltrasie | 1 | ||
Steriliserende filtrasie | |||
circRNA-LNP kwaliteit beheer | Inkapselingsdoeltreffendheid | 1 | Toetsverslag |
Deeltjiegrootte en Polidispersiteitsindeks | |||
Zeta potensiaal |
Vinnige sintese, hoë R&D-doeltreffendheid en vooraf geoptimaliseerde oplossings;
Die inkapselingsverhouding kan meer as 90% bereik;
Die grootte van lipied-nanopartikels kan beheer word deur die vloeistofinspuitingstempo en -verhouding te verander;
circRNA-LNP produkte word bekragtig deur in vitro sel uitdrukking en kan die teikenproteïen doeltreffend uitdruk.
LNP-eGFP circRNA monsters word voorberei en die verskillende dosisse daarvan (1ug, 2ug en 4ug) word direk in 293T selle getransfekteer om te verifieer of hulle die teikenproteïen kan uitdruk. Na 48 uur van transfeksie kan 'n duidelike fluoresserende sein waargeneem word, en daar is 'n dosis-eskalasie effek van fluoressensie intensiteit.
Lipo-circ_eGFP, wat bestaan uit liposoom en ongekapsuleerde eGFP circRNA word as 'n kontrole geneem.