In die voorbereidingsproses van in vitro transkripsie (IVT) mRNA, word gelineariseerde plasmied DNA benodig as die transkripsie templaat vir IVT met behulp van T7 RNA polimerase. Plasmied DNA van hoë gehalte is noodsaaklik vir in vitro transkripsie.
Gebaseer op die volwasse plasmied-voorbereidingsdiensplatform, kan Yaohai Bio-Pharma 'n gelineariseerde plasmied-DNA-voorbereidingsdiens van hoë suiwerheid en hoë standaard bied om doeltreffende IVT-transkripsie te bewerkstellig.
Dienste Besonderhede
| proses |
Opsionele diens |
Diensbesonderhede |
Afleweringstydperk (werksdag) |
| Omsendbrief plasmied voorbereiding |
Genesintese |
Geensintese (derdeparty) |
7-10 |
| Plasmiedversterking |
Plasmiedversterking |
2 |
| Plasmied onttrekking |
| Gelineariseerde plasmied voorbereiding |
Plasmied linearisering en suiwering |
Plasmied linearisering |
1 |
| Linearisering DNA suiwering |
| Plasmied DNA kwaliteit beheer |
Konsentrasie suiwerheid |
Ultraviolet (UV) spektrofotometrie |
1-2 |
| Plasmied konformasie |
Agarose gel elektroforese (AGE) |
| Kapillêre elektroforese (CE) - opsioneel |
| Plasmied identifiseer |
Beperkingsensiem identifikasie/ OUDERDOM |
Ons funksies
Buigsame keuse van lineariseringsmetodes
Optimalisering van DNA-ekstraksie- en suiweringsmetodes om hoë hersteltempo's te bereik.
Streng prosesbeheerstandaarde, met 'n superheliese konformasietempo van plasmiedmonsters vir navorsing van meer as 80%.
Hoë standaard en hoë doeltreffendheid plasmied voorbereiding en kwaliteit beheer dienste om te voldoen aan eksperimentele behoeftes.
Gevallestudie
Met die Yaohai Bio-Pharma katalogus mRNA_luciferase produk as 'n voorbeeld, het die transkripsie sjabloon plasmied monster (navorsingsgraad) 'n superheliese verhouding van meer as 90%, 'n lineariseringsverhouding naby aan 100%, en 'n daaropvolgende transkripsieverhouding tot 1:200 ( gelineariseerde plasmied DNA:mRNA).
Die mRNA_luciferase verkry deur die voorbereiding van 'n gelineariseerde plasmied as 'n sjabloon word in 293T-selle getransfekteer, en die ensiem-substraat reaksie-aktiwiteit word 24 uur na transfeksie geëvalueer.
'n Voor die hand liggende sterk luciferase aktiwiteit sein kan opgespoor word, dit wil sê, die luciferase proteïen word doeltreffend uitgedruk, wat daarop dui dat die suiwerheid van die transkripsie sjabloon ten volle aan die vereiste van hoë-gehalte mRNA voorbereiding kan voldoen.
Supergedraaide plasmiedverhoudingtoets
Bekragtiging van luciferase mRNA uitdrukking in vitro
AF
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
GEEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
MS
BE
MK
UR
BN
