CircRNA-voorbereiding vereis lineêre RNA as voorlopermateriaal (RNA-voorloper) vir siklisering, waar die RNA-voorloper gewoonlik voorberei word deur gebruik te maak van gelineariseerde plasmied-DNA as 'n transkripsie-sjabloon en in vitro getranskribeer word met behulp van T7 RNA-polimerase.
Hoë kwaliteit plasmied DNA is noodsaaklik vir in vitro transkripsie (IVT). Gebaseer op die volwasse plasmied voorbereiding diens platform, kan Yaohai Bio-Pharma 'n hoë suiwerheid en standaard gelineariseerde plasmied DNA (pDNA) voorbereiding diens lewer om die integriteit van IVT produkte te verseker.
Dienste Besonderhede
| proses |
Opsionele diens |
Diensbesonderhede |
Afleweringstydperk (werksdag) |
| Omsendbrief plasmied voorbereiding |
Genesintese |
Geensintese (derdeparty) |
7-10 |
| Plasmiedversterking |
Plasmiedversterking |
2 |
| Plasmied onttrekking |
| Gelineariseerde plasmied voorbereiding |
Plasmied linearisering en suiwering |
Plasmied linearisering |
1 |
| Linearisering DNA suiwering |
| Plasmied DNA kwaliteit beheer |
Konsentrasie suiwerheid |
Ultraviolet (UV) spektrofotometrie |
1-2 |
| Plasmied konformasie |
Agarose gel elektroforese (AGE) |
| Kapillêre elektroforese (CE) - opsioneel |
| Plasmied identifiseer |
Beperkingsensiem identifikasie/ OUDERDOM |
Ons funksies
Buigsame keuse van lineariseringsmetodes
Optimalisering van DNA-ekstraksie- en suiweringsmetodes om hoë hersteltempo's te bereik.
Streng prosesbeheerstandaarde, met 'n superheliese konformasietempo van plasmiedmonsters vir navorsing van meer as 80%.
Hoë standaard en hoë doeltreffendheid plasmied voorbereiding en kwaliteit beheer dienste om te voldoen aan eksperimentele behoeftes.
Gevallestudie
Neem Yaohai Bio-Pharma se produk mCherry circRNA as 'n voorbeeld, die supergedraaide verhouding van transkripsietemplate plasmiedmonsters (navorsingsgraad) is meer as 70%, met 'n linearisasiekoers van naby aan 100%.
mCherry circRNA word voorberei met gelineariseerde plasmied as 'n templaat en getransfekteer in 293T-selle. Hoë vlak van fluoressensie-uitdrukking (rooi fluoressensie) word bespeur na 24 uur van transfeksie, wat na 48 uur verbeter sal word, en kan steeds op die 7de dag en die 14de dag na transfeksie opgespoor word.
mCherry-proteïen word stabiel en doeltreffend uitgedruk, en die transkripsionele sjabloonsuiwerheid kan voldoen aan die vereiste van circRNA-geneesmiddelproduk (DP) met 'n hoë gehalte.
In vitro uitdrukking validering van mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
GEEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
