Alle Kategorieë
Sel-gebaseerde Potensie-toetse

Sel-gebaseerde Potensie-toetse

Tuisblad >  IVT RNA  >  mRNA Analise en Toetsing  >  Sel-gebaseerde Potensie-toetse

Sel-gebaseerde Potensie-toetse

Die Betekenis van mRNA Potensie-toets

Met die vinnige ontwikkeling van mRNA-vakswels en terapeutika word 'n spesifieke reeks van analitiese metodes benodig om die potensie te toets (hul biologiese aktiwiteit te bepaal), wat die vertaalingsdoeltreffendheid van mRNA behels. Hierdie metodes is gewoonlik gebaseer op seltransfeksie en funksionele toetse van die teikenprotein.

Yaohai Bio-Pharma bied selgebaseerde potensie-toetse vir mRNA-drogsubstansies of LNP-produkte, insluitend seltransfeksie (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 selle, ens.) en ELISA-of Western Blotting (WB)-toetse.

Reguleringsvereistes vir Potensie-toetse

Volgens die WHO-reguleringsverwagtinge, “Moet die krag van elke part van die eindige vakswyn bepaal word deur 'n toereikend kwantitatiewe en gevalideerde funksionele metode(e). Moontlike in vitro-kragtoetsings mag selgebaseerde transaksiesisteme of selloosse toetse insluit.” En die USP het 'n “selgebaseerde toets” voorgestel om die krag van mRNA te toets, d.w.s., uitdrukking van die teikenprotein.

Analitiese Metode

Analise

Metodes

Kragtoetsinge

Selgebaseerde transaksie en teikenproteïen-identifisering:

293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7-selle, ens.

Prosedure

Stap 1. Selgebaseerde Transaksie met mRNA of mRNA-LNP

Die selle word gekultiveer en getransfekteer met mRNA of mRNA-LNP. In detail, word mRNA na gemeng wees met 'n transaksie-agtik getransfekteer, terwyl mRNA-LNP direk in die selle getransfekteer word. Na 24-48 ure, word die oorskot wat die uitgedrukte proteïen bevat deur sentrifugering verduidelik.

Stap 2. Funksionele Toetse van die Teikenproteïen

Voer ELISA-of WB-toetse uit om die funksionele binding van die teikenproteïne te evalueer.

Gevallestudie

Seltgebaseerde Kragsvertoningstoetse van mRNA-steekproewe

Yaohai-BioPharma het 'n seltgebaseerde kragsvertoningstoetsmetode vir mRNA ontwikkel, wat seltkweek, selpenetrering en proteïenfunksionele toetse insluit. Ons het eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferase mRNA en spike-proteïen mRNA in 293T-selle gepentreer en die teikenproteïen deur fluoresensie, liggie of gekleurde signale, WB, ELISA opgespoor.

5

Seltgebaseerde Kragsvertoningstoetse van mRNA-produkte deur Yaohai Bio-Pharma

Kry 'n Gratis Offerte

Get in touch