Ronde mRNA (circRNA) word wydverspreid gebruik in die studie van gen- of proteïenfunksies. Tegelykertyd is dit gewild in die ontwikkeling van voorsorg- en terapeutiese biologiese produkte, soos mRNA.
Yaohai Bio-Pharma het 'n reeks circRNA-sintesetegnologieë ontwikkel om hoë-kwaliteits RNA te verskaf, soos volgordeontwerp en -optimering, in vitro-transkripsie (IVT), rondmaking/sirkulasie, verfynings, en lipids nanopartikel (LNP)-inkapseling. Alle produkte word onder streng kwaliteitsbeheer (QC) standaarde vrygestel.
In vergelyking met lineêre mRNA is sirkulêre RNA (circRNA) struktureel meer stabiel en 'n groot warme punt in die huidige navorsing oor nukleïne-weetegene. Dit het 'n wydverspreide toepassing in verskillende velde, of as koderende circRNA of nie-koderende circRNA, insluitend voorkomende vaksine vir infeksieuse siektes, terapeutiese onkologievaksine, terapeutiese onkologiese geneesmiddels, proteïenvervangingsteroosie, hernubare geneeskunde, sel- en geneterapie (CGT), molekulêre sponsrol en RNA aptamer.
Proses | Opsionele Diens | Diensbesonderhede | Levertydperk (Dag) |
ontwerp en Optimalisering van circRNA-Sekwensies | Ontwerp en optimering van koderingssekwenses | CDS-kodonoptimalisering | 1 |
Ontwerp en optimalisering van nie-koderende volgordes | Intron- en Exonsekwensie, Homoloogste Arm en Ruimte Ontwerp en Optimalisering | 1-2 | |
Sirkulêre Plasmiedbereiding | Geensintese | Genusynthese (Derde party) | 7-10 |
Plasmidversterking | Plasmidversterking | 2 | |
Plasmidextractie | |||
Lineêre Plasmidvoorbereiding | Plasmidlinearisering en -reiniging | Plasmid-linearisering | 1 |
Linearisering van DNA-reiniging | |||
In Vitro Transkripsie en Sikliserings | In Vitro Transkripsie en Sikliserings | In Vitro Transkripsie en Sikliseringsreaksies | 1-2 |
RNase R-vertering | |||
Optimalisering - opsioneel | Reaksie samestelling, tyd optimalisering | 2-5 | |
circRNA-ontsmetting | Konvensionele reinigingsmetode | Lithiumchloried sedimentasie | 1 |
Magnetiese korrelzuivering | 1 | ||
Baie reine circRNA-reiniging | Voorbereidende hoë prestasie vloeistofkromatografie (HPLC) | 1-2 | |
Buffer ruil | Ultrafiltrering | 1 | |
circRNA-lyofilisering | Voorbeeldvulling | Volledig | 2-3 |
Lyofilisering | Voorvervriesing | ||
Eerste droogte (sublimasie) | |||
Tweede droogte (desorpsie) | |||
circRNA-LNP Inkapseling | LNP-inkapseling | Materiale en Vloeistof Voorbehandeling | 2 |
Mikrofluidiese Toestel Menging | |||
Buffer ruil | Tangensiale Vloei Filtrering | 1 | |
Steriliseer | Filtrasie | ||
Kwaliteitstoets van Plasmid DNA | Konsentrasie/vlaktheid | Ultraviolette (UV) Spektrofotometrie | 1-2 |
Plasmidkonformasie | Agarose Gel Elektrofose (AGE) | ||
Kapillaire Elektroforesis (CE)-Opsioneel | |||
Plasmididentifisering | Beperkingsenime-identifisering/AGE | ||
Kwaliteitstoetsing van circRNA | Konsentrasie/vlaktheid | Ultraviolette (UV) Spektrofotometrie | - |
Suiwerheid | Agarose Gel Elektroforesis (AGE)/E-Gel | 0.5 | |
HPLC-opsioneel | 1 | ||
Kwaliteitbeheer van circRNA-LNP | Insluitingsdoeltreffendheid | RiboGreen Metode | 1 |
Deeltjestoot | Dinamiese Ligverspreiding (DLS) | 1 | |
Polidispersiteitindeks | Dinamiese Ligverspreiding (DLS) | 1 | |
Zeta-kracht | Dinamiese Ligverspreiding (DLS) | 1 | |
Selle-gebaseerde Potensie-toets | Selle-transfeksie | Sellenaanplating, selle-transfeksie | 4 |
Doelwitprotein-opsporing | Fluoresensie-observasie, Western Blot/ELISA | 1-3 |
Ons het verhoogde groen fluoreserende eiwit rond RNA (eGFP rond RNA), mCherry rond RNA, luciferase rond RNA in 293T-selle getransfekteer en die teiken eiwit deur fluoresensie, liggies of kleursignaal, westers vlek (WB), enzym-gelinkte immunosorbensie-assay (ELISA) opgespoor.
Selgebaseerde Potensieassai van circRNA-steekproewe deur Yaohai Bio-Pharma