mRNA is wyd gebruik in die studie van geen- of proteïenfunksies. Intussen is dit algemeen in die ontwikkeling van profilaktiese en terapeutiese biologiese middels. As 'n algemene sintesestrategie vir RNA-molekules, stel in vitro transkripsie (IVT) ons in staat om pasgemaakte transkripsies doeltreffend te verkry.
Yaohai Bio-Pharma het 'n stel mRNA-sintesetegnologieë gevestig om hoëgehalte-RNA te verskaf, soos volgordeontwerp en -optimalisering, IVT, suiwering, vriesdroging en lipied-nanopartikel (LNP) inkapseling. Alle produkte word vrygestel onder streng gehaltebeheer (QC) standaarde.
Met die uitbreek van die COVID-19-pandemie in 2020, het mRNA-tegnologie met rasse skrede gevorder, en die verwante navorsing en toepassings het ongekende ontwikkeling gekry, insluitend profilaktiese entstowwe vir die voorkoming van aansteeklike siektes, terapeutiese onkologie-entstowwe en middels, tumorterapie, proteïen vervangingsterapie, regeneratiewe medisyne en sel- en geenterapie (KWB).
mRNA-entstof | mRNA Terapeutika |
|
proses | Opsionele diens | Diensbesonderhede | Afleweringstydperk (werkdag) | aflewerbare |
mRNA-volgorde-ontwerp en -optimalisering | Ontwerp en optimalisering van koderingsreekse | CDS-volgorde-ontwerp en kodonoptimalisering | 1-3 | Volgorde lêer |
Ontwerp en optimalisering van nie-koderende rye | Ontwerp en optimalisering van UTR, polyA rye | |||
Transkripsie Sjabloon Plasmied Voorbereiding | Rekombinante plasmied voorbereiding | Genesintese | 7-10 | |
Plasmied amplifikasie en ekstraksie | 4 | |||
Plasmied linearisering en suiwering | ||||
mRNA in vitro transkripsie | Ko-transkripsiebeperking (eenstap-metode) | In vitro transkripsie (IVT) / Cap analoog | 1-2 | N / A |
Nukleotiedmodifikasies (UTP/CTP modifikasies) | ||||
DNA-sjabloonverwydering (DNase I) | ||||
Ensiematiese afdekking (twee-stap proses) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotiedmodifikasies (UTP/CTP modifikasies) | ||||
DNA-sjabloonverwydering (DNase I) | ||||
mRNA-suiwering (litiumchloried/magnetiese krale) | ||||
Ensiematiese afdekking | ||||
mRNA-suiwering | Konvensionele suiweringskema | Litiumchloried neerslag | 1 | mRNA dwelmstof |
Magnetiese krale suiwering | ||||
Chromatografie kolom suiwering skema | Kombinasie van veelvuldige chromatografiemetodes | 1-2 | ||
Buffer ruil | ultrafiltrasie | 1 | ||
mRNA Lyofilisering | Lyofilisasie | Voorvries | 2-3 | mRNA gelyofiliseerde poeier |
Primêre droging (sublimasie) | ||||
Sekondêre droging (desorpsie) | ||||
mRNA Encapsulation | LNP-inkapseling | LNP-inkapseling | 2-3 | mRNA-LNPDrug produk |
Konsentrasie en bufferuitruiling | ||||
mRNA Kwaliteit Analise | mRNA dwelmstof/gevriesdroogde poeier | Konsentrasie, suiwerheid | 1 | Toetsverslag |
Integriteit, kapdoeltreffendheid, polyA-stertverspreiding | 2-5 | |||
mRNA-LNP dwelm produk | Inkapselingsdoeltreffendheid | 1 | ||
Deeltjiegrootte en verspreiding | ||||
Oppervlaklading | ||||
mRNA Uitdrukking Validasie | 293T-sel-evaluering | Selplatering | 4 | |
Verbygaande transfeksie van selle | ||||
Fluoresensie sein waarneming | 1-3 | |||
Western klad (WB) / Ensiem-gekoppelde immunosorbent toets (ELISA) |
5' Cap | ▪ Onbeperk ▪ Cap0, saamgekap ▪ Cap1, saamgekap ▪ Cap1, ensiematiese kapping |
5' UTR/3' UTR | ▪ Natuur UTR-volgorde ▪ Mutant/Gemanipuleerde UTR-volgorde |
3' PolyA-stert | ▪ 100A ~120A stert (aanbeveel) ▪ Gesegmenteerde polyA-stert ▪ Ander Pasgemaakte sterte |
Gemodifiseerde nukleosiede | ▪ Ongewysigde basisse ▪ Pseudouridien (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridien (N1Ψ) ▪ 5-metielsitosien (m5C) ▪ 5-metieluridien (m5U) ▪ 5-metoksuuridien (5moU) ▪ 2-tiouridien (s2U) ▪ 2'-O-metiel-U ▪ Ander wysigings |
Geïntegreerde diensvloei
Verskaf 'n reeks dienste van voorkant-volgorde-ontwerp tot agterkant-mRNA-voorbereiding, kwaliteitbeheer en uitdrukkingsvalidering.
Internasionale voorpuntreeksontwerp en -optimalisering
Professionele mRNA-volgorde-ontwerp en -optimalisering fasiliteer doeltreffende mRNA-uitdrukking.
Gediversifiseerde nukleotiedmodifikasies
Verhoog mRNA uitdrukking effektief en verminder mRNA nadelige immuunresponse.
Volwasse suiweringsplatform
Deur 'n konvensionele en selfontwerpte suiweringsmetode te kombineer, word mRNA-monsters met 'n hoë suiwerheid verkry
Voltooi QC-platform
Verryk QC-opsies om aan die vereistes van roetinetoetse te voldoen, soos konsentrasie, A260/280-suiwerheid en integriteit, sowel as hoëgehaltebeheervereistes, soos kapdoeltreffendheid/polyA-verspreiding.
vinnige aflewering
Pasgemaakte mRNA kan binne so vinnig as 7 dae afgelewer word, behalwe vir uitgekontrakteerde volgordesintese.