Sleutelensimme vir Lang-RNA Produksie
mRNA, as 'n tipe lang kodende RNA, het veilig en doeltreffend by 'n wyer reeks mense tydens COVID-19 opgetree. Ander lange kodende RNAs, soos self-verveldende RNA (saRNA) en sirkel-mRNA (circRNA), het ook doeltreffendheid getoon in voor-kliniese en kliniese studies.
Groot-skaal produksie van lang kodende RNA hang af van in vitro transkripsie (IVT) deur verskeie ensimmatiese reaksies. Die stappe van RNA-produksie sluit in voorbereiding van templaat-DNA, IVT-RNA sintese, sirkulasie, DNA-verwijdering, RNA-modifikasie (kap en staart) en RNA-purifikasie.
Daar is verskeie sleutelenasmine wat gebruik word in die produksie van lank kodende RNA (bv. mRNA, saRNA en circRNA), insluitend beperkingsendonuklease, T7 RNA-polimerase (T7 RNAP), RNAse-inhibitor, anorganiese pirofosfaatase, DNase I, vaccinia-kap-enzyme en RNAse R.
|
Proses
|
Ensim
|
Funksie
|
|
Templaat-DNA-voorbereiding
|
Beperkingsendonuklease
|
Linearisering van plasmid-DNA (pDNA) om langer transkripte te voorkom.
|
|
IVT RNA-sintese
|
T7 RNA-polimerase (T7 RNAP)
|
Bind aan die T7-promotor en genereer spesifieke RNA-transkripte; Speel 'n sleutelrol tydens die IVT-reaksie.
|
|
RNase-inhibitor, rekombinant
|
Inhibeer RNase-aktiwiteit tydens die IVT-reaksie.
|
|
Pirifosfaatase, anorganiese (iPPase)
|
Voorkom pyrofosfaat tydens die IVT-reaksie.
|
|
DNA-verwijdering
|
DNase I
|
Verwyder die DNA-sjabloon.
|
|
RNA-wyziging
|
Vaccinia-kapping enzym
|
Voeg Cap1-strukture by die 5′-end van IVT mRNA toe.
|
|
2’-O-Methyltransferase
|
| circRNA-verrykings |
Rnase r |
Verwerf lineêre RNA en verrikonstrueer sirkulêre RNA. |
Yaohai Bio-Pharma bied 'n eenmalige CDMO-oplossing vir ensemme
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
