Proteazy do usuwania znaczników
Aby poprawić rozpuszczalność i uprościć proces oczyszczania rekombinowanych białek, badacze zwykle dodają znaczniki fuzyjne, z których powszechnie stosuje się znacznik His, białko wiążące maltozę (MBP) i S-transferazę glutationową (GST).
Chociaż jest oznaczony jako dodatkowa sekwencja białka, powinien zostać usunięty, aby zachować aktywność biologiczną w przemyśle farmaceutycznym. Usunięcie znaczników fuzyjnych wymaga proteaz specyficznych dla miejsca, takich jak enterokinaza (EK), trombina, proteaza wirusa wżerania tytoniu (TEVp), proteaza ludzkiego rinowirusa 3C (HRV3C), proteaza białka modyfikującego małą ubikwitynę (SUMO), wirus plamistości żył tytoniu ( TVMV) i karboksypeptydazę A/B (CPA/CPB).
|
Typ
|
Enzym
|
Miejsce uznania
|
|
Endoproteazy do usuwania znaczników
|
Enterokinaza (EK), Enteropeptydaza
|
DDDDK↓
|
|
Trombina
|
LVPR↓GS
|
|
proteaza TEV
|
ENLYFQ↓G
|
|
Proteaza HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
|
Proteaza SUMO
|
Struktura trzeciorzędowa SUMO
|
|
Proteaza TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
|
Egzoproteazy do usuwania znaczników
|
Karboksypeptydaza A (CPA)
|
Aminokwasy C-końcowe, z wyjątkiem Pro, Lys i Arg
|
|
Karboksypeptydaza B (CPB)
|
C-końcowy Lys i Arg
|
Inne proteazy
|
Zastosowanie
|
Enzym
|
Funkcjonować
|
|
Inne proteazy
|
Proteaza K
|
Proteaza serynowa trawiąca białka poprzez hydrolizę wiązań peptydowych.
|
|
IdeS, proteaza IgG
|
Enzymy degradujące IgG (Ides), które rozszczepiają w określonym miejscu immunoglobuliny G (IgG), tworząc fragmenty Fab i Fc
|
|
Proteaza IgA1
|
Enzym proteolityczny przecinający określone miejsce w sekwencji regionu zawiasowego ludzkiej immunoglobuliny A1 (IgA1).
|
Nukleaza
|
Zastosowanie
|
Enzym
|
Funkcjonować
|
|
Nukleaza
|
Nukleaza
|
Rozszczepia kwasy nukleinowe (DNA lub RNA) poprzez hydrolizę wiązań fosfodiestrowych.
|
|
Ogranicz enzym
|
Endonukleaza rozcinająca DNA w określonych miejscach lub w ich pobliżu.
|
Amidaza
|
Zastosowanie
|
Enzym
|
Funkcjonować
|
|
Amidaza
|
PNGaza F
|
Rozszczepia najbardziej wewnętrzne reszty GlcNAc i asparaginy oligosacharydów o wysokiej zawartości mannozy, hybrydowych i złożonych.
|
Yaohai Bio-Pharma oferuje kompleksowe rozwiązanie CDMO dla odczynnika enzymatycznego
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NIE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
