Proteazy usuwające tagi
Aby poprawić rozpuszczalność i uprościć proces oczyszczania białek rekombinacyjnych, badacze zwykle dodają tagi fuzyjne, z których His-tag, białek wiążącego maltozę (MBP) oraz glutation-S-transferazy (GST) są powszechnie stosowane.
Podczas gdy tag jest dodatkowym ciągiem białka, powinien zostać usunięty, aby utrzymać aktywność biologiczną w przemyśle farmaceutycznym. Usuwanie tagów fuzyjnych wymaga proteaz o określonych miejscach rozpoznawania, takich jak enterokynaza (EK), trombina, proteaza wirusa tytoniowego (TEVp), proteaza wirusa ludzkiego rynowirusa 3C (HRV3C), proteaza małego białka modyfikującego ubiquitin (SUMO), proteaza wirusa tytoniowego plamienia żył (TVMV) oraz karboksypeptydaza A/B (CPA/CPB).
|
Typ
|
Enzym
|
Miejsce rozpoznawania
|
|
Endoproteazy usuwające tagi
|
Enterokinaza (EK), enteropeptydaza
|
DDDDK↓
|
|
Trombie
|
LVPR↓GS
|
|
Proteaza TEV
|
ENLYFQ↓G
|
|
Proteaza HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
|
Proteaza SUMO
|
Trzeciastopniowa struktura SUMO
|
|
Proteaza TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
|
Eksoenzymy usuwające tagi
|
Karboksypeptydaza A (CPA)
|
Aminokwasy na końcu łańcucha C, z wyjątkiem Pro, Lys i Arg
|
|
Karboksypeptydaza B (CPB)
|
Lys i Arg na końcu łańcucha C
|
Inne proteazy
|
Zastosowanie
|
Enzym
|
Funkcja
|
|
Inne proteazy
|
Proteaza K
|
Serinowa proteaza, która trawi białka poprzez hydrolizę wiązań peptydowych.
|
|
IdeS, proteaza IgG
|
Enzymy degradujące IgG (Ides), które rozcinają w określonym miejscu immunoglobuliny G (IgG), tworząc fragmenty Fab i Fc.
|
|
Proteaza IgA1
|
Enzym proteolityczny, który rozkłada określony punkt w sekwencji rejonu zawiesiny immunoglobuliny A1 (IgA1) człowieka.
|
Nuklease
|
Zastosowanie
|
Enzym
|
Funkcja
|
|
Nuklease
|
Nuklease
|
Rozcinają kwas nukleinowy (DNA lub RNA) poprzez hydrolizę wiązań fosfodiesterowych.
|
|
Restrykcyjny enzym
|
Endonuclease, która rozcinają DNA w lub blisko określonych miejsc.
|
Amidaza
|
Zastosowanie
|
Enzym
|
Funkcja
|
|
Amidaza
|
PNGase F
|
Rozkłada między wewnętrznym GlcNAc a resztami asparaginu wysokomannowych, hybrydowych i złożonych oligosacharydów.
|
Yaohai Bio-Pharma Oferta Kompleksowego Rozwiązania CDMO dla Reagentów Enzymatycznych
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
