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Charakterisierung der Proteinstruktur

Charakterisierung der Proteinstruktur

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Strukturelle Charakterisierung von Proteinen

Proteine ​​bestehen aus Aminosäureketten, die miteinander interagieren und eine quaternäre Struktur bilden. Die Struktur von Proteinen kann primär, sekundär, tertiär oder quaternär sein und steht in direktem Zusammenhang mit ihrer Funktion. Yaohai Bio-pharma bietet Strukturcharakterisierungsdienste an, die auf ICH Q6B ausgerichtet sind, um die primäre und höherstufige Struktur von Proteinmolekülen vollständig zu charakterisieren.

Wir waren an der Proteinstrukturcharakterisierung verschiedener großer Moleküle beteiligt, darunter rekombinante Untereinheitenimpfstoffe, Einzeldomänenantikörper (sdAbs)/VHHs, Antikörperfragmente, Hormone/Peptide, Zytokine, Wachstumsfaktoren (GF), Enzyme, Kollagene usw.

Strukturelle Charakterisierung von Proteinen

Physikalisch-chemische Charakterisierung

Primäre Aminosäuresequenzierung

Höherstufige Struktur

Posttranslationale Modifikation (PTM)

Analysemethoden
Analyse Methoden
Molekulargewicht Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie (LC-MS) / Flüssigchromatographie/Elektrospray-Massenspektrometrie (LC/ES-MS) von intakten, reduzierten und N-deglykosylierten Proteinen
Größenvariantenanalyse LC-MS, Größenausschlusschromatographie-Massenspektrometrie (SEC-MS), Dynamische Lichtstreuung (DLS), Analytische Ultrazentrifugation (AUC), Größenausschlusschromatographie-Mehrwinkel-Lichtstreuung (SEC-MALS)
Ladungsvariantenanalyse LC-MS, Ionenaustauschchromatographie-Massenspektrometrie (IEX-MS)
Thermische Stabilität (Tm) Differenzial-Scanning-Kalorimeter (DSC)
Extinktionskoeffizient Aminosäureanalysatoren
Peptidkartierung LC-MS nach Proteaseverdau
Proteinsequenz-Abdeckung LC-MS nach 1-3-Verdau
N-terminale Sequenzierung LC-MS nach Verdauung, bestimmt durch PeptidmappingEdman-Abbau
C-Terminus-Sequenzierung LC-MS nach Aufschluss
Disulfidbindungen LC-MS nach Aufschluss
Freie Sulfhydrylgruppen Ellman-Test
Aminosäureoxidation LC-MS, Umkehrphasen-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (RP-HPLC) oder Hydrophobe Interaktionschromatographie-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HIC-HPLC) und Massenspektrometrie (MS)
Aminosäureisomerisierung LC-MS nach enzymatischer Spaltung
Desamidierung LC-MS nach enzymatischer Spaltung
N-Terminus Modifikation LC-MS nach Aufschluss
C-Terminus-Modifikation LC-MS nach Aufschluss
C-terminales Lysin-Clipping LC-MS nach Aufschluss
N-Glykan-Profiling LC-MS freigesetzter Glykane
N-Glykosylierungsstelle LC-MS nach enzymatischer Spaltung
Belegung der N-Glykosylierungsstelle LC-MS nach Deglycosylase- und Proteaseverdau (Trypsin oder Asp-N)
Höherstufige Struktur Zirkulardichroismus (CD)Infrarotspektrometer (IR)
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