Enzim rekombinan

Kebimbangan

Enzim Rekombinan untuk Kegunaan Terapi

Enzim terapeutik yang diperoleh melalui proses bioteknologi digunakan secara meluas untuk beberapa aplikasi klinikal, termasuk terapi penggantian enzim, pemecahan metabolit dan toksin yang terakumulasi, rawatan kanser, dan penyuntingan genom. Beberapa enzim terapeutik boleh dihasilkan dalam sistem ungkapan mikrobia.

PERMOHONAN	Enzim	Bahan	Produk Pipelines Tipikal
Terapi Penggantian Enzim	Adenosine deaminase, ADA	Adenosine atau deoxyadenosine	Elapegademase-lvlr (Revcovi)
Terapi Penggantian Enzim	Fenilalanin amonia lyase, PAL	Fenilalanin	Pegvaliase-pqpz (Palynziq)
Penguraian Metabolit Terakumulasi	Uricase/Urate Oksidase	Asid urik	Peglticase (Krystexxa)Rasburicase (Fasturtec)
	Kolagenase	Kolagen 'bekas luka'	Kolagenase clostridium histolyticum (Xiaflex, Qwo, Santyl)
	Plasmin yang dipendekkan	Kolagen, fibronektin, dan laminin	Ocriplasmin (Jetrea)
	Truncated tissue plasminogen activator (tPA)	Plasminogen	Reteplase (Retavase)
	IgG Protease	Immunoglobulin G (IgG)	Imlifidase (Idefrix)
	IgA Protease	Immunoglobulin A (IgA)	PKU308/AP308IGAN IgA protease
Pemecahan Toxin	Carboxypeptidase G2	Methotrexate	Glucarpidase (Voraxaze)
Rawatan kanker	Enzim spesifik Asparagine	Asparagine	Asparaginase (Elspar) Calaspargase pegol-mknl (Asparlas)
Penyuntingan Genom	Cas9 Nuclease	Gen sasaran	Exagamglogene autotemcel (Exa-cel, CTX001)

Enzim Rekombinan sebagai Bahan

Terdapat beberapa enzim yang digunakan dalam pengeluaran RNA kodan panjang (contohnya, mRNA, saRNA, circRNA), pengeluaran gabungan antibodi–ubat (ADCs), dan lain-lain. Enzim yang dihasilkan oleh mikrob lebih kos-efektif berbanding sel mamalia, terutamanya sistem ungkapan E. coli.

PERMOHONAN	Enzim	Fungsi
Enzim untuk Pengeluaran RNA Linear, bebas RNase	Endonukleasa penghantaran	Penglinearan DNA plasmid (pDNA) untuk mengelakkan penjanaan transkrip yang lebih panjang.
	Polimerase RNA T7 (T7 RNAP)	Menyambung kepada penerbit T7 dan menghasilkan transkrip RNA spesifik; Memainkan peranan kunci semasa tindak balas transkrip in vitro (IVT).
	Enzim penutup Vaccinia	Menambah struktur Cap kepada hujung 5′ mRNA IVT.
	Pirofosfatase, anorganik (iPPase)	Mencegah pirofosfat semasa tindak balas IVT.
	Penyahkis RNase, rekombinan	Menghalang aktiviti RNase semasa tindak balas IVT.
	DNase I	Mengalih keluar templat DNA.
Enzim untuk pengeluaran circRNA, bebas RNase	Rnase R	Cerna RNA linear dan kaya RNA bulat.
Penyambungan glikan yang dibaiki oleh enzim	Peptid-N-glikosidase (PNGase F)	Memutus ikatan amida antara sakarida pertama GlcNAc dan sisi Asn297; Bebaskan glikan daripada antibodi IgG.
	Transglutaminase bakteria (BTG)	Sambungkan muatan secara spesifik tapak untuk menghasilkan ADCs.
	Sortase A	Katalisis penyambungan protein.
	β1,4-galaktosidase	Lepas semua galaktosa terminal dan bentuk isoform G0 yang seragam bagi antibodi.
	β1,4-galaktosiltransferase (Gal-T)	Pindahkan sisa gula dengan kumpulan fungsional yang reaktif secara kimia.
	α2,6-sialiltransferase (Sial T)	Takrifkan sisa asid sialik terminal ke dalam struktur glikan asli suatu antibodi.
Penubuhan semula glikan bermediator enzim dan glykoengineering	Endo-N-asetilglukosaminidase (ENGase)	Hidrolisis ikatan β1,4-glikosidik antara GlcNAcβ1–4GlcNAc pada N-glikan; Buang glikan N-berikat pada rantau Fc antibodi IgG.
	Endoglikosidase S (EndoS)
	Glikosiltransferase (GTs)	Pindahkan N-glikan oksazolin kepada IgGs yang telah didefukosilasi.
Lain-lain	Enzim dihasilkan oleh strain mikrobial	Kebutuhan tersuai

Enzim Rekombinan sebagai Reagen

Enzim Pengalih Tag

Tag fusi sering digunakan untuk meningkatkan kelarutan dan kestabilan protein rekombinan yang diingini dan membuatnya lebih mudah untuk dipurifikasi. Tag yang biasa digunakan termasuk His-tag, protein pengikat maltosa (MBP), glutathione-s-transferase (GST), dll.

Biasanya, urutan pautan ditambahkan di antara tag fusi dan urutan protein sasaran untuk mengeluarkan tag. Pengeluaran tag fusi memerlukan protease spesifik-lokasi, seperti enterokinase (EK), trombin, protease virus etch tembakau (TEVp), protease virus rhinovirus manusia 3C (HRV3C), protease protein penyempurnaan ubikitin kecil (SUMO), protease virus bercak vena tembakau (TVMV), dan peptidase A/B karboksil (CPA/CPB).

TAIP	Enzim	Tapak Kenalpastian
Endopeptidasa pengalih tag	Enterokinase (EK), Enteropeptidase	DDDDK↓
	trombin	LVPR↓GS
	TEV protease	ENLYFQ↓G
	HRV3C protease	LEVLFQ↓GP
	SUMO protease	Struktur terpasak SUMO
	TVMV protease	ETVRFQG↓S
Penyingkir tag eksoprotease	Carboxypeptidase A (CPA)	Asid amino C-terminal, kecuali Pro, Lys dan Arg
Penyingkir tag eksoprotease	Carboxypeptidase B (CPB)	Lys dan Arg C-terminal

Enzim Protease, Nuklease dan Amidase lain

PERMOHONAN	Enzim	Fungsi
Protease lain	Protease K	Sebuah protease serina yang mencerna protein dengan melikat ikatan peptida.
	IdeS, IgG protease	Enzim penguraian IgG (Ides) yang memotong pada lokasi spesifik immunoglobulin G (IgG), menghasilkan pecahan Fab dan Fc
	IgA1 protease	Sebuah enzim proteolitik yang memotong lokasi spesifik dalam urutan rantai engsel immunoglobulin A1 manusia (IgA1).
Nuklease	Nuklease	Membelah asid nukleik (DNA atau RNA) dengan menghidrolisis ikatan fosfodiester.
Nuklease	Enzim restriksi	Sejenis endonuclease yang membelah DNA pada atau berhampiran kepada tapak spesifik.
Amidase	PNGase F	Memisahkan di antara N-asetilglukosamin (GlcNAc) yang paling dalaman dan sisa asparigin bagi oligosakarida mannosa tinggi, hibrida, dan kompleks.

Yaohai Bio-Pharma Menawarkan Penyelesaian CDMO Satu Henti untuk Enzim Rekabentuk

Rujukan:

[1] Hennigan JN, Lynch MD. Masa lalu, kini, dan masa depan rawatan berasaskan enzim. Drug Discov Today. 2022 Jan;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.

Semua Kategori

Enzim rekombinan

Kebimbangan