Kepentingan Penapisan Strain
Penapisan hos yang sesuai adalah perlu untuk pembangunan CMC bagi produk biologi, yang menentukan kualiti dan kestabilan produk serta proses pengeluaran. Objektif terus penapisan hos adalah untuk memberikan bank sel asas calon (PCB), dengan tahap ungkapan tinggi dan kestabilan tinggi baik dari segi kestabilan penerusan mahupun kestabilan penyimpanan. Penapisan hos yang sesuai adalah perlu atas dua sebab utama:
- Pertama, untuk memilih hos mikrob dengan tahap ungkapan tinggi. Terdapat pelbagai strain yang tersedia secara komersial, yang digunakan untuk mengungkapkan jenis protein yang berbeza, seperti protein toksik, protein larut, atau protein eukariotik.
- Kedua, untuk menyaring hos dengan kestabilan genetik. Ujian kestabilan genetik adalah titik utama sepanjang hayat pengeluaran. Dijadikan bahawa kestabilan genetik tinggi dikenali sebagai ciri utama lain untuk strain yang sesuai.
Kata kunci: pemilihan strain mikrobia, penyaringan strain mikrobia, penyaringan berkeupayaan tinggi bagi bakteria atau ragi, penyaringan strain pengeluaran tinggi, penyaringan strain stabil tinggi, penyaringan strain genetik stabil Aplikasi: ubat manusia, ubat haiwan, vaksin, biologi sintetik, biologik molekul besar rekombinan, bahan biologi
Perkhidmatan Penyaringan Strain Yaohai Bio-Pharma
Dengan faedah lebih 10 tahun pengalaman CDMO dalam biologi mikrobial, kami menyokong pembangunan dan pengeluaran pelbagai molekul besar, termasuk vaksin subunit rekombinan, zarah serupa virus (VLP), hormon (insulin, GLP-1, hormon pertumbuhan), sitokina (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), faktor pertumbuhan (EGF, FGF, NGF), nanobodies/Single-domain antibodies (sdAbs), enzim, dll.
Kami telah mengumpul pengalaman yang kaya dalam pemilihan pelbagai jenis vektor plasmid dan hos mikrobial, termasuk Bakteria Escherichia coli (E. coli), dan ragi Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Kami boleh mencari sistem ungkapan terbaik untuk biologik unik anda.
Kami telah mengumpul pelbagai hos mikrob dengan sumber yang jelas dan CoA piawai, termasuk E.Coli ungkapan bakteria dan ungkapan ragi.
Butiran Perkhidmatan
|
Perkhidmatan
|
Butiran Perkhidmatan
|
Masa Minimum/Minit
|
Hasil Kerja
|
|
Pembinaan Strain (E. coli)
|
Transformasi plasmid (hos berganda)
|
5
|
COA hos dagangan Laporan pembinaan strain
|
|
Pengesahan PCR
|
|
Pemurnian strain
|
|
Pemeliharaan strain
|
|
Pembinaan Strain (Khamir)
|
Penyediaan sel khamir yang cekap
|
10
|
|
Linearisasi plasmid
|
|
Elektro transformasi
|
|
Skrin ketahanan/Kekurangan nutrisi
|
|
Pemurnian strain
|
|
Pemeliharaan strain
|
|
Penapisan Hos Sesuai
|
Pengekstrakan DNA Plasmid atau Genom
|
15-20
|
Proses saringan hostsCOA strain kejuruteraan
|
|
Pengesahan PCR, pencernaan enzim pembatas
|
|
Penjanaan Gen Sasaran
|
|
Skrinan hos dengan pengungkapan tinggi
|
|
Skriman hos dengan kestabilan genetik
|
|
Pemeliharaan strain
|
Kajian Kes
Tuan rumah yang sesuai meningkatkan tahap ekspresi protein sebanyak 2.5 kali.
Kami ditugaskan untuk membangunkan pengeluaran tinggi E. coli ketegangan. Dan kami cuba tiga jenis iklan E. coli tuan rumah, berdasarkan ciri-ciri protein sasaran. Ia ditunjukkan bahawa strain S1-1 dan S1-2 (Gambar A: Lane 1,2) meningkatkan tahap protein kepada 3.5 kali daripada strain awal klien (Gambar A: Lane 3).
Selain itu, strain S1-1 menunjukkan kestabilan genetik yang tinggi (Rajah B), dan ia dikenali sebagai strain calon untuk perbankan sel permulaan (PCB).
Ciri-ciri Perkhidmatan Kami
Kemahiran yang ditunjukkan dengan pelbagai hos mikrobial, contohnya, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae dan H. polymorpha .
Kami berpengalaman dengan E. coli pengecaman periplasma, ungkapan larut dan badan termasuk, serta ungkapan intrasel atau pengecaman dalam ragi. Kami tidak menambah antibiotik atau menambah antibiotik di bawah panduan peraturan.
Kami membentuk platform penyaringan throughput tinggi untuk menyaring strain pengeluaran tinggi dan stabil daripada lebih daripada seratus strain calon.
Ia dipastikan bahawa proses kejuruteraan strain dan penyaringan adalah boleh dilacak, di bawah Pengurusan Data dan Rekod yang Baik.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
