Deamidasi rantai sisi glutamin dan asparagin adalah pengubahsuaian biasa dari segi kesan ke atas sifat biofarmaseutikal protein. Deamidasi boleh berlaku dalam sisa glutamin, tetapi biasanya pada kadar yang lebih rendah. Kadar deamidasi dipengaruhi oleh suhu, pH, struktur protein tempatan dan sisa aminoasil mengapit.
Yaohai BioPharma menawarkan perkhidmatan ujian deamidasi asid amino, yang membolehkan anda mengesan deamidasi asid amino oleh Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS).
Kami telah terlibat dalam Pencirian Struktur Protein pelbagai molekul besar, termasuk Vaksin Subunit Rekombinan, Nanobodies/VHHs/ Antibodi domain Tunggal (sdAbs), Fragmen Antibodi, Hormon/Peptida, Sitokin, Faktor Pertumbuhan (CF), Enzim, Kolagen, dan lain-lain.
Keperluan Kawal Selia untuk Deamidasi Asid Amino
Menurut garis panduan ICH Q6B, bentuk deamidasi boleh dikesan dan dicirikan oleh kaedah analisis kromatografi, elektroforetik dan/atau lain-lain yang berkaitan.
Kaedah Analisis
| Analisis |
Kaedah |
| Deamidasi |
Kromatografi Cecair-Spektrometri Jisim (LC-MS) |
Prosedur
cth, deamidasi aspartik
1. Pencernaan enzimatik
2. LC-MS di bawah keadaan Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi (HPLC).
3. Analisis data
Deamidasi asparagin berlaku melalui perantaraan succinimide (Suc), yang terdedah kepada perlumbaan dan hidrolisis, menghasilkan empat isomer Asp, termasuk L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp dan D-IsoAsp.
Secara teorinya, deamidasi Gln boleh menghasilkan empat isomer Glu yang sepadan melalui proses yang serupa dengan deamidasi Asn.
Spektrometri jisim peleraian tinggi dengan mudah mengenal pasti perbezaan jisim 1-Da antara peptida yang mengandungi Asn/Gln dan rakan sejawatannya yang dinyahmidasi sepadan dengan Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
